中文名：磺化CY5叠氮（水溶性CY5叠氮）
英文名：Sulfo-Cyanine5 Azide（简称Sulfo-CY5-N3、Sulfo-Cy5-N3、Sulfo-Cy5 Azide）
CAS号：1481447-40-8；1621101-43-6（不同异构体/形式）
分子式：C₃₅H₄₃N₆NaO₇S₂（钠盐形式）；C₃₆H₄₆N₆O₇S₂（常规形式）
分子量：762.98（钠盐形式）；738.92（常规形式）
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一、分子结构与基础信息
本品属于花菁染料（Cyanine）家族，是CY5近红外荧光染料经磺化修饰并引入叠氮基团（-N₃）的水溶性活性衍生物，核心结构由三部分组成：CY5荧光母核、磺酸基团（-SO₃⁻）与末端叠氮基团，通过柔性连接臂形成稳定大共轭体系，兼具CY5优异的近红外荧光性能、高水溶性与叠氮基团的点击化学反应活性。磺化修饰通过引入强极性磺酸基团，显著提升分子水相分散性，利用负电荷间的静电排斥作用减少分子聚集，避免荧光淬灭，同时降低与生物分子的非特异性结合，叠氮基团作为特异性反应位点，为生物正交标记提供便利。
二、物理化学特性
外观为深蓝色至紫红色固体粉末，对光敏感、易吸潮[5][6]；水溶性极佳，可直接溶于水、PBS缓冲液、Tris缓冲液等水相体系，也易溶于DMSO、DMF、甲醇等极性有机溶剂，无需有机助溶剂辅助溶解，相较于非磺化版本，水溶性提升数十倍；最大激发波长约649-650nm，最大发射波长约670-672nm，处于近红外区域（NIR-I区间），组织穿透力强、背景荧光极低，消光系数高达250000 L·mol⁻¹·cm⁻¹，荧光量子产率约0.2，光稳定性优异；在pH 4-10范围内光学性能稳定，荧光强度波动小于10%，适配633nm或647nm激光检测设备，可与Alexa Fluor 647、DyLight 649等染料通用滤片[5][6]。
三、反应特性与应用
其核心反应特性源于末端叠氮基团（-N₃），可参与两种主流点击化学反应，反应条件温和、专一性强、效率高，对生物分子功能影响极小：一是铜离子（Cu⁺）催化下的Huisgen 1,3-偶极环加成反应（CuAAC），反应快速（30分钟内可完成）、产率高，适用于体外标记；二是无铜点击化学（SPAAC），与环张力炔烃（如DBCO、BCN）反应，无需催化剂，适用于活细胞或体内标记，可避免铜离子对细胞的毒性。主要应用于蛋白/抗体、多肽、核酸等炔基修饰生物分子的荧光标记，还可用于纳米材料表面功能化、荧光探针构建、活细胞示踪、组织成像、小动物体内成像、生物传感及多重荧光检测等科研场景，可与Cy3、FITC等其他波段荧光染料联用实现多通道检测。
四、质量与使用提示
科研级纯度≥95%（HPLC检测），部分高纯级可达99%，干燥失重≤1.0%，无蛋白酶、核酸酶等杂质；短期可2-8℃干燥避光保存，长期建议-20℃避光、干燥密封保存，建议分装存放避免反复冻融，冻干粉形式可稳定保存2-3年，室温运输不超过3周；对光敏感，储存、操作及反应全程需避光，防止荧光淬灭；水溶液建议现配现用，若用DMSO配制母液，-20℃避光可保存1个月，-80℃可保存6个月；叠氮基团对强还原剂敏感，避免与高浓度DTT（>1mM）长时间共存，以防还原失活；操作时需在通风橱内进行，佩戴防护装备，避免接触皮肤与黏膜；标记反应可在纯水溶液中进行，CuAAC反应需添加CuSO₄与还原剂（如抗坏血酸钠），反应后可通过透析、凝胶过滤或HPLC去除未反应试剂及副产物；本品仅限科研使用，禁止用于临床诊断、治疗及其他非科研用途