中文名:异硫氰酸荧光素葡聚糖(异硫氰酸荧光素标记葡聚糖)
英文名:Fluorescein Isothiocyanate-Dextran(简称FITC-Dextran、FITC-葡聚糖)
CAS号:60842-46-8
分子式:因葡聚糖分子量不同存在差异(葡聚糖为葡萄糖单元聚合物,FITC标记比例不同略有差异)
分子量:常规系列为3kDa-2000kDa(常见4kDa、10kDa、40kDa、70kDa、500kDa等,可按需选择)
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一、分子结构与基础信息
本品是由异硫氰酸荧光素(FITC)与天然葡聚糖(Dextran,又称右旋糖酐)通过共价键偶联形成的荧光标记多糖衍生物,核心结构由两部分组成:葡聚糖的天然多糖骨架与FITC荧光发色团。葡聚糖是由葡萄糖单元通过α-1,6糖苷键连接形成的线性多糖,具有良好的水溶性、生物相容性和结构稳定性,不易被体内酶类降解;FITC通过自身异硫氰酸酯基团(-N=C=S)与葡聚糖分子中的羟基或氨基发生亲核加成反应,形成稳定的硫脲键(-NH-CS-NH-),实现荧光标记。其分子结构兼具葡聚糖的生物相容性与FITC的荧光示踪特性,解决了单纯葡聚糖无法可视化追踪的问题。
二、物理化学特性
外观为淡黄色至橙色固体粉末,部分冻干品为疏松块状,对光敏感、易吸潮;水溶性优异,可直接溶于水、PBS缓冲液、HEPES缓冲液等水相体系,也可溶于甲醇、DMSO等极性有机溶剂,溶解后形成均匀透明溶液;荧光特性稳定,最大激发波长约488-495nm,最大发射波长约518-525nm,发射明亮的绿色荧光,荧光量子产率高,信号强度稳定,适配荧光显微镜、流式细胞仪、酶标仪等常规检测设备;在中性至弱碱性环境(pH 7.0-9.0)中光学性能最稳定,酸性环境(pH<4)会导致荧光强度减弱;化学稳定性良好,葡聚糖骨架不易降解,FITC标记牢固,不易脱落,光稳定性较好,但需避光保存以防荧光淬灭;分子量是其核心特性参数,不同分子量影响其扩散能力和应用场景,分子量越大,流体力学半径越大,扩散速度越慢。
三、反应特性与应用
本品核心优势在于兼具荧光示踪性与生物相容性,无需额外进行活性修饰即可直接用于各类体内外科研实验,其反应特性主要体现在FITC标记键的稳定性,偶联形成的硫脲键不易水解,可在生理条件下长期保持荧光活性。根据分子量差异,应用场景具有明确区分:低分子量(3kDa-20kDa)扩散速度快,适用于细胞内吞途径分析、内涵体逃逸研究及小分子转运实验;中分子量(40kDa-70kDa)扩散速度适中,常用于细胞单层屏障通透性检测、血管内皮完整性评估、药物递送追踪等;高分子量(150kDa-2000kDa)空间位阻大,适用于血管通透性检测、淋巴系统示踪、前哨淋巴结定位及肿瘤血管渗漏研究。此外,还可用于组织屏障功能评估、纳米载体表面荧光修饰、生物传感等科研场景,可与Cy3、Cy5等其他波段荧光染料联用实现多通道检测。
四、质量与使用提示
科研级纯度≥95%(HPLC检测),FITC与葡萄糖单元标记比例可按需定制(常规为1:100-1:250),干燥失重≤1.0%,无蛋白酶、核酸酶等杂质,无游离FITC残留;短期可4℃避光干燥保存,长期建议-20℃避光、干燥密封保存,冻干固态形式可稳定保存1-2年,建议分装成小份存放,避免反复冻融;室温运输不超过3周,需采用冰袋冷藏,防止高温导致荧光衰减;对光敏感,储存、操作及实验全程需避光,防止荧光淬灭,可添加抗淬灭剂(如p-苯二胺、Trolox)提升荧光稳定性;水溶液建议现配现用,溶解后可在4℃避光保存3-7天,若用DMSO配制母液,-20℃避光可保存1个月以上;使用时需选择中性缓冲液(如PBS、HEPES),避免使用含伯胺的缓冲液(如Tris),以防影响荧光强度;偶联反应完成后,可通过透析(选用MWCO~10kDa膜)、凝胶过滤(Sephadex G-25或G-50)等方法纯化,去除未反应的FITC及小分子副产物;操作时需在通风橱内进行,佩戴防护装备,避免接触皮肤与黏膜,从冰箱取出后需回温至室温再开盖,防止受潮;本品仅限科研使用,禁止用于临床诊断、治疗及其他非科研用途。