Recombinant Human Asprosin
重组人白脂素（Asprosin）的检测通常采用ELISA方法，其核心原理是基于双抗体夹心法，通过特异性抗体识
别并定量样本中的人白脂素蛋白。
商品介绍：
| A-01K99417-50μg | Recombinant Human Asprosin |
| A-01K99417-200ug | Recombinant Human Asprosin |
| A-01K99417-1mg | Recombinant Human Asprosin |
别称：Fibrillin-1, FBN1, FBN
宿主：E.Coli
表达区间：2732-2871
分子量：17 kDa
标签：N-terminal His Tag
产品名称：Recombinant Human Asprosin
种属：Human
宿主：E.Coli
表达区间：2732-2871
分子量：17 kDa
标签：N-terminal His Tag
纯度：Greater than 90% as determined by SDS-PAGE.
应用：Western Blot, ELISA
性状：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution of 10 mM Hepes, 150 mM NaCl with 5% trehalose,
pH 7.4.
溶解方法:Centrifuge the vial before opening, reconstitute in sterile distilled water to a concentration of 0.1-1 mg/ml by gently pipetting 2-3 times, don't vortex.
存储:The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
别名:Fibrillin-1, FBN1, FBN
检测原理详解：
包被抗体结合
实验开始前，微孔板已预先包被抗人白脂素单克隆抗体。当加入待测样本后，样本中的人白脂素（Asprosin）
会与固相载体上的捕获抗体特异性结合。
形成“夹心复合物”
洗涤去除未结合物质后，加入生物素标记的检测抗体，该抗体与白脂素分子的另一表位结合，形成“固相抗体
—抗原—检测抗体”三明治结构。
酶促显色反应
随后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，与生物素检测抗体结合。最后加入TMB显色底物，在
HRP催化下产生蓝色产物，反应终止后变为黄色。
浓度定量分析
黄色深浅与样本中白脂素含量成正比，通过酶标仪在450nm波长处测定吸光度（OD值），并根据标准曲线计
算出样本中白脂素的浓度。
公司正在出售的产品：
| 人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE) | CEBPβ；CRP-2 elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(TRAIL-R3) | ALPPL2 elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体2(TRAIL-R2/DR5) | SUR1；ABCC8 elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4) | CENPM elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3) | CPOX elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1) | ColI Ab elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6) | SOCS5 elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子受体相关因子1(TRAF1) | LTBP4 elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子受体超家族成员18(TNFRSF18) | sPDGFR elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ) | SLC10A4 elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ) | KCNK6 elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子超家族15(TL1A/TNFSF15) | TSPAN8 elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子γ(TNFγ) | CLDN7 elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子β(TNFβ) | CDH16 elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE) | KLRK1；NKG2D elisa试剂盒 |
| 人肿瘤坏死因子α(TNFα) | UGPase2 elisa试剂盒 |
| 人肿瘤关联钙信号转导因子2(TACSTD2) | LC3A；3B elisa试剂盒 |
实验步骤：
1. 基因克隆与表达载体构建
从人类FBN1基因C端序列中扩增Asprosin编码片段（约140aa）。
将目的片段插入原核表达载体，确保带有N端或C端His标签，便于后续纯化。
转化至感受态细胞，筛选阳性克隆并测序验证。
2. 重组蛋白诱导表达
取阳性菌落接种于LB培养基（含氨苄青霉素），37℃振荡培养过夜。
次日按1:100比例转接至新鲜LB培养基，37℃培养至OD600达0.6–0.8。
加入IPTG至终浓度0.1–1.0 mM，16–25℃诱导表达6–12小时（低温诱导有助于可溶性表达）。
4℃、8000×g离心10分钟收集菌体，弃上清，-20℃保存备用。
3. 菌体裂解与蛋白提取
将菌体沉淀重悬于裂解缓冲液（如PBS + 1% Triton X-100 + 蛋白酶抑制剂），超声破碎（冰浴条件下，每次30秒，共6–10次，功率30%）。
4℃、12000×g离心20分钟，收集上清（可溶性蛋白）或沉淀（包涵体蛋白）。
❗ 若为包涵体蛋白，需用洗涤缓冲液（含2M尿素的PBS）洗涤2–3次，去除杂蛋白。
4. 亲和层析纯化（Ni-NTA法）
将含His标签的蛋白溶液（或溶解后的包涵体蛋白，使用含6–8M尿素的缓冲液溶解）上样至Ni-NTA亲和层析柱。
用洗涤缓冲液（含20–40mM咪唑）洗去非特异性结合蛋白。
用洗脱缓冲液（含250–500mM咪唑）梯度洗脱目标蛋白，收集洗脱峰。
透析去除尿素与咪唑（使用PBS或生理缓冲液，4℃过夜，更换3次）。
5. 蛋白复性（针对包涵体蛋白）
若蛋白以包涵体形式表达，需在纯化后进行梯度复性：
将变性蛋白缓慢加入含梯度降低尿素（6M → 4M → 2M → 0M）的复性缓冲液中，4℃搅拌过夜。
或采用透析法逐步去除变性剂。
复性后再次离心取上清，检测蛋白活性。
关键字： Recombinant Human As;Human;E.Coli;
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