Recombinant Human CCL14
商品介绍:

A-01K101632-50μg | Recombinant Human CCL14 |
A-01K101632-200ug | Recombinant Human CCL14 |
A-01K101632-1mg | Recombinant Human CCL14 |
别称:CC-1, CC-3, CCL14, CCL14_HUMAN, chemokine (C-C motif) ligand 14, Chemokine CC-1/CC-3, chemokine CC1, chemokine CC3, chemokine HCC1, chemokine HCC3, CKb1, HCC 1, HCC 3, HCC-1(1-74), HCC-1(9-74), HCC-1/HCC-3, HCC-3, HCC1, HEMOFILTRATE CC CHEMOKINE 1, MCIF, NCC-2, NCC2, new CC chemokine 2, SCYA14, SCYL2, small inducible cytokine subfamily A (Cys-Cys), member 14, Small-inducible cytokine A14, SY14
标签:N-terminal His Tag
种属:Human
宿主:E.Coli
表达区间:28-93
分子量:7.2 kDa
Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用:Western Blot, ELISA
性状:Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
纯度:Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
商品概述:

Recombinant Human CCL14(重组人CCL14),又称HCC-1,是一种在大肠杆菌中表达的非糖基化多肽链蛋白(常见形式为66或72个氨基酸,分子量约7.8-8.4 kDa),作为CC趋化因子家族成员,它主要通过与CCR1受体结合来趋化单核细胞,并参与调控免疫应答、肿瘤发生及病毒防御等生物学过程12。
重组蛋白的制备流程:

重组蛋白的制备流程主要包括以下几个关键步骤:
1.基因获取:从生物体中提取目的基因,可通过PCR技术扩增特定DNA片段,也可以人工合成基因序列,确保所获取的基因能编码目标重组蛋白。
2.载体构建:将获取的目的基因与合适的载体连接,常见载体有质粒、噬菌体等。载体需具备复制原点、筛选标记等元件,使目的基因能在宿主细胞中稳定复制和表达。
3.宿主细胞转化:把构建好的重组载体导入宿主细胞,如大肠杆菌、酵母细胞或哺乳动物细胞等。转化方法有化学转化法、电穿孔法等。
4.筛选与鉴定:运用抗生素筛选、PCR鉴定、测序等方法,挑选出含有重组载体的阳性克隆细胞。
5.蛋白表达:优化培养条件,诱导阳性克隆细胞表达重组蛋白。根据宿主细胞类型和蛋白特性,调整温度、诱导剂浓度等参数。
6.蛋白纯化:采用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤等方法,从细胞裂解液或培养液中分离纯化重组蛋白。
7.质量检测:对纯化后的重组蛋白进行纯度、活性、分子量等检测,确保其符合质量要求。
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收到产品后的处理:

离心收集:重组蛋白通常以冻干粉形式提供。在运输过程中,粉末可能会粘附在管壁或管盖上。因此,在开盖前,务必先进行短暂离心(例如 10,000-12,000 rpm,30秒),将冻干粉收集于管底。
复溶操作
选择合适的溶剂:
仔细阅读产品说明书,严格按照推荐的溶剂和浓度进行复溶。
通常使用无菌的 PBS 缓冲液或低盐缓冲液(如 10 mM Tris, pH 8.0)。
切勿使用纯水,因为缺乏缓冲能力和合适的离子强度可能导致蛋白沉淀或失活。
轻柔混匀:
向冻干粉中加入推荐体积的溶剂,用移液器枪头轻轻吹打或缓慢上下颠倒混匀。
绝对禁止涡旋震荡,因为剧烈的剪切力会破坏蛋白质的空间结构,导致其变性失活。
如果蛋白难以溶解,可将其置于 4℃ 静置 2 小时以上或在水平摇床上低速摇晃。
达到推荐浓度:
初次复溶时,建议将蛋白浓度配制在说明书推荐的范围内(通常不低于 100 μg/mL),这有助于维持蛋白的稳定性。
关键字: CCL14;Human;E.Coli;
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