基本信息
中文名称:PCR片段纯化回收试剂盒
货号:P-PR1501
规格:50T、100T
英文名称:PCR Fragment Purification and Recovery Kit
作用机制:通过特殊的吸附介质(如硅胶膜、磁珠)特异性结合DNA片段,去除PCR反应体系中的引物、dNTP、聚合酶等杂质,再通过洗脱液将纯净的DNA片段洗脱下来。
适用样本:PCR扩增产物、酶切反应产物等DNA片段溶液。
产品简介
本试剂盒采用独特的缓冲体系和离心吸附柱/磁珠技术,可同时实现两种功能:既能够从TAE或TBE琼脂糖凝胶中回收100bp - 8kb的DNA片段,也可直接纯化PCR产物,回收率可达80%以上。纯化后的DNA纯度高,可直接用于连接、转化、酶切、测序、荧光定量PCR等多种分子生物学实验。
产品特点
兼容性强:一套试剂盒即可完成DNA凝胶回收和PCR产物直接纯化两种实验
操作便捷:无需复杂的试剂配制,全程操作可在30分钟内完成
可视化控制:配有pH指示剂,可直观判断DNA结合的最佳条件,确保回收效率
灵活处理:支持从微量到大量样本的处理,适配不同实验规模需求
结果可靠:纯化产物纯度高,能满足高要求的下游实验
试剂盒组成
组分名称 规格
结合缓冲液 50ml
漂洗液 100ml
洗脱缓冲液 10ml
离心吸附柱/磁珠 50/200个
收集管 50/200个
pH指示剂(可选) 1ml
实验操作步骤
PCR产物直接纯化流程
样本准备:取50 - 100μL PCR反应液,加入等体积的结合缓冲液,充分混匀。若反应液不足50μL,可加入TE缓冲液补足至50μL后再加结合缓冲液。
结合反应:将混合液转移至离心吸附柱中,室温放置2分钟,12,000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。
清洗杂质:向吸附柱中加入700μL漂洗液,12,000rpm离心1分钟,倒掉废液。重复此步骤1次。
干燥吸附膜:将吸附柱放回收集管中,12,000rpm离心2分钟,彻底去除残留的漂洗液。
洗脱DNA:将吸附柱置于干净的离心管中,向吸附膜中央加入30 - 50μL洗脱缓冲液(预热至60℃可提高回收率),室温放置2分钟,12,000rpm离心2分钟,收集得到纯化后的PCR产物。
琼脂糖凝胶DNA回收流程
胶块处理:用干净的手术刀割下含有目的DNA片段的琼脂糖凝胶块,尽量去除多余的凝胶,减少胶块体积。
溶胶反应:向胶块中加入等体积的结合缓冲液,55 - 60℃水浴加热,期间每隔2分钟轻轻混匀一次,直至胶块完全溶解。
结合与清洗:后续步骤与PCR产物直接纯化流程的步骤2 - 5完全相同。
注意事项
漂洗液使用前需确认已加入指定体积的无水乙醇,否则会影响纯化效果。
洗脱缓冲液的pH值需在7.0 - 8.5之间,过低会降低DNA的洗脱效率。
若要长期保存纯化后的DNA,建议将产物置于-20℃环境中。
实验过程中使用的所有离心管和吸头均需保证无核酸酶污染。
对于大于5kb的DNA片段,可适当降低离心转速,避免片段断裂。
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关键字: PCR片段纯化回收试剂盒;PCR Fragment Purific;
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