基本信息
产品名称 | OG 橙绿变色管 | 货号 | P-PR1259 |
规格 | 96T | 用途 | 仅供科研 |
英文名称:OG Orange-Green Color-Changing Tube
作用机制:管内含有特殊的pH指示剂,在LAMP等等温扩增反应中,随着反应进行,dNTPs水解产生焦磷酸,与反应体系中的Mg²⁺结合形成焦磷酸镁沉淀,导致体系pH值变化,指示剂颜色从橙色变为绿色,通过颜色变化直观判断扩增反应是否发生。
适用样本:适用于LAMP等温扩增实验的终点检测,可用于病原体检测、基因分型等,样本包括临床样本、食品样本、环境样本等。
产品概述
一种具有颜色变化指示功能的反应管,常用于等温扩增实验(如LAMP)。当管内发生核酸扩增反应时,反应体系中的pH值会发生变化,引发管内指示剂的颜色从橙色变为绿色,通过肉眼即可判断扩增反应是否发生,无需额外的检测设备。该变色管操作简便,适合现场快速检测、基层实验室检测等场景,可直观、快速地得到实验结果。
产品特点
直观可视化检测:通过颜色变化(橙色→绿色)直观判断等温扩增反应是否发生
pH响应指示:利用扩增反应中的pH变化触发颜色改变,无需额外检测设备
操作简便:无需复杂仪器,肉眼即可判断结果,适合现场快速检测
兼容性强:适配各种等温扩增实验(如LAMP)
操作步骤
一、试剂预处理
取出洗涤液Ⅰ和洗涤液Ⅱ浓缩液,按试剂瓶标注比例加入无水乙醇,充分混匀后备用
将洗脱液置于65℃水浴锅中预热
二、水样处理与核酸富集
取10mL预处理后的水样(杂质较多的水样需先经0.45μm滤膜过滤)加入50mL洁净烧杯
依次加入0.5mL核酸富集因子、5mL病毒裂解液及50μL消化液,充分搅拌混匀
将烧杯置于65℃水浴中孵育15分钟,期间每隔5分钟搅拌一次
三、核酸纯化与洗脱
向烧杯中加入15mL异丙醇,充分搅拌混匀后,将混合液转移至连接富集吸附柱的50mL注射器针筒内
静置2分钟后,开启真空抽滤装置,将液体缓慢抽滤至富集吸附柱内(注意不要抽干)
向针筒内加入5mL洗涤液Ⅰ,静置2分钟后抽滤;再加入5mL洗涤液Ⅱ,静置2分钟后抽滤,重复洗涤液Ⅱ步骤1次
取下富集吸附柱,放入收集管中,12000rpm常温离心3分钟,去除残留洗涤液
将吸附柱转移至新的收集管,加入50-100μL预热的洗脱液,静置2分钟后12000rpm离心2分钟
收集管中的液体即为纯化后的病毒核酸,可直接用于下游实验或-70℃保存
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注意事项
试剂保存:试剂盒应避光保存于2-8℃,有效期12个月;核酸富集因子避免反复冻融,使用后立即放回冰箱
水样预处理:高浊度或杂质过多的水样,需先经0.45μm滤膜过滤,避免堵塞吸附柱
操作规范:实验全程佩戴手套、口罩、护目镜等防护用品,避免直接接触水样与试剂;若不慎接触皮肤或眼睛,立即用大量清水冲洗
试剂配制:洗涤液需现用现配,按比例加入无水乙醇后充分混匀,未使用的稀释液可在2-8℃保存1个月
核酸保存:提取的核酸若长期保存,需置于-70℃环境,避免反复冻融;短期可在4℃保存24小时
器材要求:所有实验器材需为无RNA酶耗材,实验前可经180℃干烤6小时或用RNA酶清除剂处理
关键字: OG 橙绿变色管;OG Orange-Green Colo;
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