基本信息
产品名称 | BCA Protein Assay Kit | 货号 | P-PR1335 |
规格 | 50-500T | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：BCA Protein Assay Kit
作用机制：基于BCA（二喹啉甲酸）法检测蛋白质浓度。在碱性条件下，蛋白质中的肽键与Cu²⁺结合将其还原为Cu⁺，Cu⁺与BCA试剂结合形成紫色复合物，在562nm处有最大吸收峰，通过测定吸光度值并与标准曲线对比，计算出蛋白质的浓度。
适用样本：适用于各种生物样本的蛋白质浓度测定，如细胞裂解液、组织匀浆、血清、血浆、纯化的蛋白质溶液等。
产品概述
基于BCA（二喹啉甲酸）法的蛋白质定量检测试剂盒，利用蛋白质分子中的肽键在碱性条件下与Cu²⁺结合生成紫色复合物，其颜色深浅与蛋白质浓度成正比，通过比色法可实现对蛋白质浓度的定量测定。该试剂盒操作简便，灵敏度高，检测范围宽，适用于细胞裂解液、组织匀浆、纯化蛋白等各类样本的蛋白质定量分析，是分子生物学、细胞生物学研究中常用的蛋白质定量工具。
产品特点
定量原理：基于BCA法，蛋白质与Cu²⁺在碱性条件下反应生成紫色复合物，颜色深浅与蛋白质浓度成正比
检测范围宽：检测范围为20-2000μg/ml，适用于大多数蛋白样品
操作简便：步骤简单，无需复杂设备，比色即可定量
兼容性强：对大多数蛋白质和肽段都有良好的反应，受干扰因素少
操作步骤
一、实验前准备
向漂洗液1中加入60mL无水乙醇，向漂洗液2中加入45mL无水乙醇，充分混匀后标记
载体RNA溶液配制：向300μg载体RNA冻干粉中加入300μL无酶水，充分溶解后得到1μg/μL的工作液，分装后-20℃保存
将冷冻样本置于室温解冻，轻轻颠倒混匀后备用
二、手工提取流程
样本裂解：取200μL血液样本至1.5mL离心管中，加入20μL蛋白裂解酶、300μL裂解缓冲液，振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）
磁珠结合：加入15μL磁珠悬浮液（使用前充分振荡混匀），振荡混匀10秒，室温孵育10分钟（每3分钟颠倒混匀1次）
磁珠分离：将离心管置于磁力架上，静置1-2分钟至磁珠完全吸附，小心吸弃上清液（避免触碰磁珠）
洗涤纯化：
取下离心管，加入500μL漂洗液1，振荡混匀1分钟，再次置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清
重复上述操作1次
加入500μL漂洗液2，振荡混匀1分钟，置于磁力架上分离磁珠，吸弃上清
重复上述操作1次
干燥磁珠：保持离心管在磁力架上，室温晾干5-10分钟（确保乙醇完全挥发，避免过度干燥）
核酸洗脱：加入100-200μL洗脱缓冲液，振荡混匀后56℃孵育5分钟，置于磁力架上分离磁珠，上清液即为提取的核酸
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注意事项
实验操作需在洁净环境中进行，佩戴手套、口罩，避免样本交叉污染
蛋白酶K需-20℃保存，使用时避免反复冻融，可分装后使用
还原剂需现用现加，避免长时间暴露于空气中失效
若毛囊样本角质化严重，可适当延长孵育时间或增加还原剂用量
提取的DNA可置于-20℃长期保存，短期可在4℃储存
若需提高DNA产量，可将洗脱液重复洗脱一次吸附柱
关键字： BCA Protein Assay Ki;
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