基本信息
产品名称 | Western一抗二抗通用稀释液 | 货号 | P-PR1344 |
规格 | 100ml | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：Western Blot Primary and Secondary Antibody Universal Diluent
作用机制：含有稳定剂、防腐剂等成分，可稀释Western blotting实验中的一抗和二抗，保持抗体的活性和特异性，同时减少非特异性结合，提高实验的信噪比。
适用样本：适用于各种Western blotting实验中的抗体稀释，可与各类一抗、二抗配合使用，样本为Western blotting实验中的膜或条带。
产品概述
Western一抗二抗通用稀释液是用于稀释Western Blot实验中一抗与二抗的专用缓冲液。它包含合适的pH缓冲体系、蛋白稳定剂及防腐剂等成分，能为抗体提供稳定的保存环境，维持抗体的活性与特异性。该稀释液可有效降低抗体非特异性结合，减少背景噪音，提高实验的信噪比。其通用性强，适用于绝大多数来源的一抗（如兔源、鼠源等）与HRP标记的二抗，使用时可根据抗体说明书或实验需求按比例稀释抗体，操作简便，能确保抗体在实验过程中保持良好的结合活性，为Western Blot实验的成功提供保障。
产品特点
通用型配方：适配绝大多数兔源、鼠源、羊源等一抗与HRP标记二抗，无需单独配制稀释液。
抗体稳定性高：添加蛋白稳定剂与防腐剂，4℃可保存抗体稀释液1-2周，避免抗体失活。
降低非特异性结合：优化的封闭成分减少抗体与膜的非特异性结合，降低背景噪音。
使用灵活：可根据实验需求调整稀释比例，推荐稀释范围为1:500-1:10000。
操作步骤
一、样本准备
取1-5mL漱口水样本转移至15mL离心管中，12000rpm离心10分钟，弃上清，收集细胞沉淀。
二、细胞裂解
向离心管中加入200~400μL细胞裂解液，再加入15~20μL蛋白酶K溶液
涡旋震荡10秒充分混匀，将离心管放入75℃恒温震荡器中，900rpm恒温震荡裂解45分钟
裂解完成后短暂离心，将上清液转移至新的离心管中
三、DNA吸附
向裂解上清中加入等体积的结合缓冲液，轻轻颠倒混匀
将混合液全部转移至一次性吸附柱中，12000rpm离心30秒，弃收集管中的废液
向吸附柱中加入500μL漂洗液，12000rpm离心30秒，弃废液；重复此漂洗步骤1次
四、DNA洗脱
将吸附柱放回收集管，12000rpm离心2分钟，彻底去除残留漂洗液
将吸附柱转移至新的1.5mL离心管中，向吸附柱中心加入50~100μL洗脱缓冲液（可预热至65℃提升洗脱效率）
室温静置2分钟，12000rpm离心1分钟，离心管中的液体即为提取完成的基因组DNA
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使用建议
溶解与保存：建议以液体形式保存于-20℃，避免反复冻融。
反应条件：常规反应温度为37℃，灭活需50℃处理5分钟。
推荐用量：根据实验体系优化，通常每50μL反应体系添加0.1-1U。
关键字： Western一抗二抗通用稀释液;Western Blot Primary;
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