基本信息
产品名称 | 蛋白酶及磷酸酶抑制剂混合物ABC（100X） | 货号 | P-PR1337 |
规格 | 100μlX3 | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：Protease and Phosphatase Inhibitor Cocktail ABC (100X)
作用机制：包含多种蛋白酶抑制剂（如丝氨酸蛋白酶抑制剂、半胱氨酸蛋白酶抑制剂等）和磷酸酶抑制剂，可抑制细胞裂解和蛋白质提取过程中蛋白酶和磷酸酶的活性，防止蛋白质的降解和去磷酸化，保持蛋白质的天然状态和修饰。
适用样本：适用于各种生物样本的蛋白质提取，如细胞、组织、血清等，用于Western blotting、免疫沉淀、蛋白质组学分析等实验。
产品概述
蛋白酶及磷酸酶抑制剂混合物ABC（100X）是一种广谱的蛋白保护试剂，用于在细胞裂解、蛋白提取及保存过程中抑制蛋白酶与磷酸酶的活性，维持蛋白的天然结构与修饰状态。该混合物包含多种丝氨酸蛋白酶抑制剂、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、天冬氨酸蛋白酶抑制剂以及磷酸酶抑制剂等成分，能同时抑制多种类型的蛋白酶（如胰蛋白酶、胃蛋白酶等）与磷酸酶（如丝氨酸/苏氨酸磷酸酶、酪氨酸磷酸酶等）的活性，有效防止蛋白被降解与去磷酸化。使用时按1:100的比例加入细胞裂解液或蛋白样品中，可广泛适用于细胞、组织等多种样本的蛋白提取与保存，为蛋白组学研究、酶活性分析等实验提供高质量的蛋白样品。
产品特点
广谱抑制作用：同时抑制丝氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸等各类蛋白酶，以及丝氨酸/苏氨酸、酪氨酸磷酸酶。
高效保护体系：多种抑制剂协同作用，全面防止蛋白降解与去磷酸化，保持蛋白天然状态。
使用便捷：100X浓缩液，按1:100比例加入裂解液，无需单独配制多种抑制剂。
兼容性广：适用于细胞、组织、细菌、酵母等多种样本的蛋白提取实验。
操作步骤
样本处理：向1.5ml EP管中加入600μl miRNA提取试剂，再加入500μl血清或血浆样本，漩涡振荡30秒充分混匀
初步分离：13000rpm离心5分钟，将上清约1ml转移至新的2ml EP管中，加入1ml异丙醇，上下颠倒混合均匀
柱式吸附：将混合液分三次加入吸附柱（每次约700μl），13000rpm离心15秒，倒掉过柱液
洗涤纯化：
向吸附柱中加入700μl 75%异丙醇，13000rpm离心15秒，倒掉过滤液
向吸附柱中加入500μl无水乙醇，13000rpm离心15秒，倒掉过滤液
干燥柱体：吸附柱13000rpm空离心2分钟，去除残留乙醇，室温放置2分钟使乙醇完全挥发
RNA洗脱：在吸附柱滤芯中央加入30μl RNase-Free TE缓冲液，室温静置2分钟，13000rpm离心2分钟，收集滤液即为提取的miRNA产物
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注意事项
样本处理：
血浆抗凝剂建议使用EDTA或柠檬酸钠，避免使用肝素（会抑制PCR检测）
样本应避免反复冻融，新鲜样本建议尽快处理
试剂使用：
miRNA提取试剂含有胍盐，具有强烈腐蚀性，操作时需佩戴防护眼镜、手套和口罩
自备试剂需确保无RNase污染，避免影响RNA完整性
实验操作：
所有操作需在无RNase环境中进行，使用RNase-Free的枪头和离心管
离心过程需确保离心管盖紧，避免液体渗漏
产物检测：
由于血清/血浆中miRNA含量极低，提取产物浓度通常在5ng/μl以下，难以用常规NanoDrop测量，建议直接取10μl进行下游反转录实验
为获得更可靠数据，推荐使用特异性和灵敏度更好的TaqMan探针法进行miRNA定量检测
产物保存：提取的miRNA产物可立即用于下游实验，或分装后置于-80℃长期保存，避免反复冻融
关键字： 蛋白酶及磷酸酶抑制剂混合物ABC（100;Protease and Phospha;
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