Recombinant Human Histone H4
重组人源组蛋白H4(Recombinant Human Histone H4)是一种通常在大肠杆菌(E. coli)中表达的高纯度碱性核蛋白(约11.4 kDa,含103个氨基酸),作为染色质基本结构单元——核小体的核心组件,它与组蛋白H3形成异四聚体,进而组装成组蛋白八聚体,负责将约147 bp的DNA紧密缠绕以维持染色体结构的稳定性。除了结构功能外,组蛋白H4也是表观遗传调控的关键枢纽,其N端尾部的乙酰化、甲基化等翻译后修饰(即“组蛋白密码”)直接调控基因转录、DNA修复及复制过程;最新的研究还揭示了
商品介绍:

A-01K101260-50μg | Recombinant Human Histone H4 |
A-01K101260-200ug | Recombinant Human Histone H4 |
A-01K101260-1mg | Recombinant Human Histone H4 |
别称:dJ160A22.1, dJ160A22.2, dJ221C16.1, dJ221C16.9, FO108, H4, H4.k, H4/a, H4/b, H4/c, H4/d, H4/e, H4/g, H4/h, H4/I, H4/j, H4/k, H4/m, H4/n, H4/p, H4_HUMAN, H4F2, H4F2iii, H4F2iv, H4FA, H4FB, H4FC, H4FD, H4FE, H4FG, H4FH, H4FI, H4FJ, H4FK, H4FM, H4FN, H4M, HIST1H4A, HIST1H4B, HIST1H4C, HIST1H4D, HIST1H4E, HIST1H4F, HIST1H4H, HIST1H4I, HIST1H4J, HIST1H4K, HIST1H4L, HIST2H4, HIST2H4A, Hist4h4, Histone 1 H4a
标签:Western Blot,ELISA
种属:Human
宿主:E.Coli
表达区间:2-103
分子量:11.1 kDa
应用:Western Blot, ELISA
性状:Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
纯度:Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
检测原理详解:

包被抗体结合
实验开始前,微孔板已预先包被抗人白脂素单克隆抗体。当加入待测样本后,
样本中的人白脂素(Asprosin)会与固相载体上的捕获抗体特异性结合。
形成“夹心复合物”
洗涤去除未结合物质后,加入生物素标记的检测抗体,该抗体与白脂素分子的另一表位结合,
形成“固相抗体—抗原—检测抗体”三明治结构。
酶促显色反应
随后加入?辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,与生物素检测抗体结合。
最后加入TMB显色底物,在HRP催化下产生蓝色产物,反应终止后变为黄色。
浓度定量分析
黄色深浅与样本中白脂素含量成正比,通过酶标仪在450nm波长处测定吸光度(OD值),
并根据标准曲线计算出样本中白脂素的浓度。
公司正在出售的产品:
丝氨酸蛋白酶56 | 酵母菌斑杂交试剂盒 |
卷曲螺旋结构域蛋白90A | 寡核苷酸探针非同位素HRP化学发光法DNA斑点杂交完全试剂盒 |
药品糖精(saccharin)含量紫外光谱法定量pcr检测试剂盒 | 载玻片细胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表达荧光显微镜酶联免疫试剂盒 |
组织Src激酶活性定量pcr检测试剂盒(A/B/C) | 植物还原型甘肽(GSH)浓度荧光定量酶联免疫试剂盒 |
乳品三聚氰胺快速显色定性pcr检测试剂盒(家用型/工业型) | SPRED1蛋白抗体 |
细胞PAR-1蛋白表达流式细胞仪pcr检测试剂盒 | GTP酶IMAP家族成员5抗体 |
5-ROX蛋白标记试剂盒 | 细菌钙ATP酶(Ca++ -ATPase)活性比色法定量pcr检测试剂盒 |
分子伴侣复合体TCP-1α | 脂质过氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaric acid)高效液相色谱 (HPLC)分析试剂盒 |
轴索过度生长抑制因子B受体 | DNA损伤修复酶ERCC3蛋白抗体 |
大鼠肾上腺总RNA | 磷酸化周期素H抗体 |
环指蛋白217 | Recombinant Human Histone H4«成纤维细胞生长因子受体4抗体 |
N-α-乙酰转移酶11 | 磷酸化细胞信号转导分子SMAD5重组兔单克隆抗体 |
Recombinant Human TAF1L | Recombinant Human IL-3 |
实验步骤:
1. 基因克隆与表达载体构建
从人类FBN1基因C端序列中扩增Asprosin编码片段(约140aa)。
将目的片段插入原核表达载体,确保带有?N端或C端His标签,便于后续纯化。
转化至?感受态细胞,筛选阳性克隆并测序验证。
2. 重组蛋白诱导表达
取阳性菌落接种于LB培养基(含氨苄青霉素),37℃振荡培养过夜。
次日按1:100比例转接至新鲜LB培养基,37℃培养至OD600达0.6–0.8。
加入IPTG至终浓度0.1–1.0 mM,16–25℃诱导表达6–12小时(低温诱导有助于可溶性达)。
4℃、8000×g离心10分钟收集菌体,弃上清,-20℃保存备用。
3. 菌体裂解与蛋白提取
将菌体沉淀重悬于裂解缓冲液(如PBS + 1% Triton X-100 + 蛋白酶抑制剂),超声破碎
(冰浴条件下,每次30秒,共6–10次,功率30%)。
4℃、12000×g离心20分钟,收集上清(可溶性蛋白)或沉淀(包涵体蛋白)。
若为包涵体蛋白,需用?洗涤缓冲液(含2M尿素的PBS)洗涤2–3次,去除杂蛋白。
4. 亲和层析纯化(Ni-NTA法)
将含His标签的蛋白溶液(或溶解后的包涵体蛋白,使用含6–8M尿素的缓冲液溶解)上样至?Ni-NTA亲和层析柱。
用?洗涤缓冲液(含20–40mM咪唑)洗去非特异性结合蛋白。
用?洗脱缓冲液(含250–500mM咪唑)梯度洗脱目标蛋白,收集洗脱峰。
透析去除尿素与咪唑(使用PBS或生理缓冲液,4℃过夜,更换3次)。
5. 蛋白复性(针对包涵体蛋白)
若蛋白以包涵体形式表达,需在纯化后进行?梯度复性:
将变性蛋白缓慢加入含?梯度降低尿素(6M → 4M → 2M → 0M)的复性缓冲液中,4℃搅拌过夜。或采用?透析法?逐步去除变性剂。复性后再次离心取上清,检测蛋白活性。
关键字: Histone H4;Human;E.Coli;
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