试剂基础物理知识
英文名：AFDye 555 NHS ester；AFDye 555 SE；AFDye 555 Osu；AFDye 555 Succinimidyl Ester
中文名：AFDye 555 活性酯；AFDye 555 琥珀酰亚胺酯
Ex(nm)：555
Em(nm)：565
试剂厂家：西安强化生物
试剂纯度：95%
试剂外观：固体
保存条件：适宜存放于-20℃的干燥、避光、防潮处
试剂简要介绍
AFDye 555 NHS ester是一种高性能的琥珀酰亚胺酯（NHS ester）活性荧光染料，广泛应用于蛋白质标记、细胞成像、流式细胞术及生物传感等实验室科研领域。
试剂性能特点
NHS 酯的高反应活性与选择性：在pH7.0-9.0的温和条件下，NHS 酯基团对胺具有高度选择性，不与巯基、羟基或羧基发生交叉反应。反应速率快，偶联效率高。
优异的光稳定性：AFDye 555经过化学优化，抗光漂白性能显著优于传统Cy3和TRITC，适合长时间活细胞成像、共聚焦多层扫描及超分辨显微镜应用。
pH耐受范围宽：在pH4-10范围内荧光特性保持稳定，适用于酸性细胞器或碱性条件下的检测实验，不会因环境pH波动导致显著的信号漂移。
试剂反应机制
亲核攻击：在弱碱性条件下，生物分子上的氨基作为亲核试剂进攻NHS酯的羰基碳。
四面体中间体形成：胺基氮原子攻击羰基碳，形成短暂的四面体中间体。
NHS离去：中间体坍塌，N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）作为离去基团被释放，同时形成热力学稳定的酰胺键。
反应动力学：该反应为二级亲核取代反应，在pH8.0左右反应速率最快；pH＞9.0时NHS酯基团的水解速率显著增加，导致标记效率下降。
推荐试剂
AF 647 Acid
Me-tetrazine-Disulfo-Cyanine3
BDP FL tetrazine
BODIPY FL-PEG2-COOH
Nile blue acrylamide
AF 647 azide
triSulfo-Cy5-methyltetrazine
CyOH-TFB-carboxylic acid
BODIPY FL-PEG5-COOH
Cy-G2Ph
BODIPY FL-X,SE
BDP FL NHS ester
AF 647-C5 amine
CyOH (iodine)
AF 647 alkyne
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