基本信息
中文名称:微量毛囊DNA提取试剂盒
货号:P-PR1471
规格:50T、100T
英文名称:Micro-scale Hair Follicle DNA Extraction Kit
作用机制:通过裂解液破碎毛囊细胞,释放基因组DNA;利用特异性吸附材料结合微量DNA,搭配蛋白酶K消化蛋白质,经多次洗涤去除角质、色素等杂质,最终洗脱得到高纯度基因组DNA,适配微量样本的高效回收需求。
适用样本:人类/动物毛囊样本(单根或少量毛囊)
产品概述
本试剂盒专为从微量毛囊样本中提取基因组DNA设计,采用特异性结合核酸的离心吸附柱/磁珠与独特缓冲液系统,可高效裂解毛囊细胞、去除杂质蛋白及其他有机化合物。提取的DNA片段完整、纯度高,质量稳定可靠,适用于PCR、荧光定量PCR、基因分型、测序文库构建等多种分子生物学实验。
试剂盒组成(以50次反应为例)
组分 规格 功能说明
裂解液 50mL 裂解毛囊细胞,释放核酸
蛋白酶K溶液 2mL 降解蛋白质,促进细胞裂解
结合液CB 30mL 调节体系盐浓度,促进DNA与吸附材料结合
漂洗液WB 25mL 去除杂质蛋白、盐离子等污染物
洗脱液EB 15mL 解离吸附柱/磁珠上的DNA
微量吸附柱(离心柱型) 50个 特异性吸附基因组DNA
磁珠悬浮液(磁珠型) 5mL 特异性吸附基因组DNA
收集管 50个 收集废液及洗脱DNA
产品特点
高灵敏度:仅需1-3根带毛囊的毛发即可提取足量DNA,满足下游实验需求
快速高效:毛囊预处理后,12-30分钟内即可完成提取流程
纯度优异:OD₂₆₀/OD₂₈₀比值可达1.7-1.9,无PCR抑制剂残留
操作便捷:无需酚/氯仿等有毒试剂,支持手工操作与自动化仪器适配
稳定性强:提取的DNA可在4℃保存3个月,-20℃长期保存无明显降解
使用方法
离心吸附柱法
样本处理:取1-3根带毛囊的毛发(剪下根部5mm)置于1.5mL离心管,加入200μL裂解液与20μL蛋白酶K溶液,涡旋震荡10秒混匀,56℃恒温震荡孵育30-60分钟。
结合反应:短暂离心后加入200μL结合液CB,震荡混匀,70℃恒温震荡10分钟,简短离心去除管盖液滴。
乙醇沉淀:加入100μL无水乙醇(室温超25℃需预冷),轻轻颠倒混匀,室温放置5分钟,简短离心。
柱吸附纯化:将混合液转移至吸附柱AC,12000rpm离心30秒,弃废液;加入500μL漂洗液WB(使用前需加无水乙醇),12000rpm离心30秒,弃废液;重复漂洗液步骤1次。
干燥洗脱:吸附柱AC放回收集管,12000rpm离心2分钟去除残留漂洗液;室温晾干2-5分钟后,转移至干净离心管,滴加20-50μL洗脱液EB,室温放置2-5分钟,12000rpm离心2分钟收集DNA。
磁珠法
样本裂解:取1-3根带毛囊的毛发置于1.5mL离心管,加入200μL裂解液与15μL蛋白酶K溶液,涡旋混匀,75℃恒温震荡裂解45分钟。
磁珠结合:向离心管加入10μL磁珠悬浮液与400μL结合液,抽打混匀后室温震荡10分钟。
洗涤纯化:离心管置于磁力架静置1分钟,去除液体;加入900μL漂洗液WB,振荡2分钟,磁力架吸附后去液体,重复洗涤一次。
干燥洗脱:室温开盖干燥5分钟,加入50-100μL洗脱液EB,振荡混匀,65℃水浴5分钟;磁力架吸附磁珠,吸取含DNA的上清至干净离心管。
注意事项
样本采集:确保毛发带有完整毛囊,无毛囊的毛干无法提取到足量DNA
试剂预处理:漂洗液WB使用前需按标签要求加入无水乙醇;若试剂产生沉淀,可室温放置或37℃水浴孵育10分钟溶解
操作规范:实验全程佩戴手套,使用无核酸酶耗材;试剂避免反复冻融,未用完可分装后-20℃保存
洗脱效率:洗脱液EB的pH值需保持在7.0-8.5范围内,可适当增加洗脱液体积或延长静置时间以提高DNA得率
保存条件:试剂盒需避光保存于2-8℃,有效期12个月;提取的DNA样本建议-20℃保存,避免反复冻融
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关键字: 微量毛囊DNA提取试剂盒;Micro-scale Hair Fol;
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