基本信息
中文名称:血浆(血清)核酸磁珠法提取试剂盒
货号:P-PR1517
规格:25T、50T
英文名称:Plasma (Serum) Nucleic Acid Extraction Kit (Magnetic Bead Method)
作用机制:利用磁珠表面的特殊基团,在特定pH和盐浓度条件下特异性结合血浆/血清中的游离核酸(DNA/RNA);通过磁分离技术将磁珠-核酸复合物与血红蛋白、纤维蛋白等杂质分离,经洗涤液去除残留蛋白与抑制剂,洗脱后获得高纯度游离核酸。
适用样本:人/动物血浆、血清样本
产品概述
本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和优化的缓冲液系统,可从血清、血浆等无细胞体液样本中分离纯化高质量的游离核酸(包括DNA和RNA)。其核心原理是利用磁珠在特定条件下对核酸的特异性吸附能力,通过改变环境条件实现核酸的快速释放,整个过程安全高效,提取的核酸可直接用于RT-PCR、荧光定量PCR、NGS分析等各类下游实验。
产品组成
组分名称 规格 储存条件
磁珠悬浮液 10mL/瓶 2-8℃冷藏
裂解缓冲液 50mL/瓶 室温(15-25℃)
漂洗液1 50mL/瓶 室温(15-25℃)
漂洗液2 50mL/瓶 室温(15-25℃)
洗脱缓冲液 10mL/瓶 室温(15-25℃)
蛋白酶K 1mL/管 -20℃冷冻
Carrier RNA冻干粉 310μg/管 室温干燥
使用说明书 1份/盒 -
产品特点
高效提取:采用独特包埋技术的磁珠,对核酸具有极强的亲和力,可实现从0.5-5mL大体积样本中高效提取游离核酸,得率高、纯度好。
灵活兼容:同时支持手工操作和自动化仪器整合,适配主流核酸提取工作站,满足不同规模的实验需求。
安全便捷:整个提取过程无需酚、氯仿等有毒有机溶剂,操作仅需样品裂解、磁珠吸附、洗涤及洗脱4个核心步骤,45分钟内即可完成。
稳定可靠:提取的核酸片段完整,杂质去除彻底,可直接用于各类下游分子生物学实验,结果重复性好。
样本友好:适用于新鲜或冷冻保存的血清、血浆样本,对降解样本也具有良好的提取效果。
操作步骤
一、试剂准备
Carrier RNA溶液配制:向装有310μg Carrier RNA冻干粉的管子中加入310μL RNase-Free ddH₂O,彻底溶解后得到1μg/μL的母液,分装后置于-20℃冷冻保存,避免反复冻融(≤3次)。
Carrier RNA工作液配制:按每310μL裂解缓冲液加入2.8μL Carrier RNA母液的比例混合,颠倒混匀(请勿涡旋),现用现配,室温放置不超过1小时。
漂洗液准备:使用前请检查漂洗液1和2中是否已加入无水乙醇(参照瓶身标签说明),若未添加,需按比例补加后混匀使用。
二、手工提取流程
取200μL平衡至室温的血清/血浆样本至1.5mL离心管中。
加入15μL充分重悬的磁珠悬浮液,振荡混匀。
加入20μL蛋白酶K,再加入300μL Carrier RNA工作液,振荡混匀10秒。
室温孵育10分钟,期间每3分钟上下颠倒混匀10秒,简短离心收集管壁液体。
将离心管置于磁力架上静置1分钟,待磁珠完全吸附后,小心吸弃上清液。
取下离心管,加入500μL漂洗液1,振荡混匀1分钟,再次置于磁力架上吸附1分钟后吸弃上清。
重复步骤6,使用500μL漂洗液2进行第二次洗涤。
开盖置于磁力架上,室温晾干5-10分钟(确保乙醇完全挥发,但避免过度干燥)。
加入50-100μL洗脱缓冲液,56℃振荡混匀5分钟,室温静置2分钟。
置于磁力架上吸附2分钟,小心将上清液转移至新的RNase-Free离心管中,提取的核酸可立即使用或-20℃保存。
三、自动化仪器提取(以KingFisher Flex为例)
按照仪器操作指南设置程序参数,将试剂和样本加入96深孔板指定位置。
启动提取程序,仪器将自动完成裂解、吸附、洗涤、洗脱等全部步骤。
程序结束后,小心收集深孔板中的核酸洗脱液,进行后续实验或保存。
注意事项
所有操作请在RNase-Free环境中进行,使用灭菌的离心管和移液器吸头,避免核酸污染。
磁珠悬浮液使用前需充分振荡混匀,确保磁珠均匀分布;蛋白酶K避免反复冻融,可分装后储存。
样本应避免反复冻融,若需长期保存,建议分装后-80℃冷冻。
若裂解缓冲液出现沉淀,可置于37℃水浴中溶解,摇匀后使用。
洗脱缓冲液可根据实验需求选择TE缓冲液或RNase-Free水,使用65℃预热的洗脱液可提高核酸得率。
本试剂盒仅供科研或临床体外诊断使用,请勿用于其他用途。
操作过程中请佩戴手套、口罩等防护用品,避免直接接触试剂。
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