牛磺酸(Taurine)又称β-氨基乙磺酸,最早由牛黄中分离出来,故得名。纯品为无色或白色斜状晶体,无臭,牛磺酸化学性质稳定,不溶于乙醚等有机溶剂,是一种含硫的非蛋白氨基酸,在体内以游离状态存在,不参与体内蛋白的生物合成。
牛磺酸广泛分布于动物组织细胞内,海生动物含量尤为丰富,哺乳类组织细胞内亦含有较高的牛磺酸,特别是神经、肌肉和腺体内含量更高,是机体内含量最丰富的自由氨基酸,体内牛磺酸几乎全部以游离形式存在,且大部分在细胞内,细胞内外浓度比为100-50000:1,人体含牛磺酸总量约为12-18克,其中15-66mg存在于血浆中,75%以上存在于骨骼肌肉,心肌细胞与血清牛磺酸浓度之比为200:1。
用纯甲醇沉淀奶粉样品中的蛋白后,以9-氯甲酸芴甲酯(FMOC)为柱前衍生剂,与奶粉中的牛磺酸发生衍生化反应后,反相高效液相色谱法测定含量。以甲醇-0.025mol/L磷酸盐缓冲溶液为流动相(pH=8.0),C18柱为分离柱,二极管阵列检测器(265nm)检测。
有关物质 照薄层色谱法(通则0502)试验。
供试品溶液 取本品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中约含20mg的溶液。
对照溶液 精密量取供试品溶液1ml,置500ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。
系统适用性溶液 取牛磺酸对照品与丙氨酸对照品各适量,分别加水溶解并稀释制成每1ml中约含2mg的溶液,各取适量,等体积混合,摇匀。
色谱条件 采用硅胶G薄层板,以水-无水乙醇-正丁醇-冰醋酸(150∶150∶100∶1)为展开剂。
测定法 吸取上述三种溶液各5μl,分别以条带状点样方式点于同一薄层板上,条带宽度5mm,展开,晾干,喷以茚三酮的丙酮溶液(1→50),在105℃加热约5分钟至斑点出现,立即检视。
系统适用性要求 对照溶液应显一个清晰的斑点,系统适用性溶液应显两个完全分离的斑点。
限度 供试品溶液如显杂质斑点,不得超过1个。其颜色与对照溶液的主斑点比较,不得更深(0.2%)。
干燥失重 取本品,在105℃干燥4小时,减失重量不得过0.4%(通则0831)。
炽灼残渣 取本品1.0g,依法检查(通则0841),遗留残渣不得过0.1%。
【含量测定】 取本品约0.2g,精密称定,加水50ml溶解,精密加入中性甲醛溶液(取甲醛溶液,滴加酚酞指示剂5滴,用0.1mol/L的氢氧化钠溶液调节至溶液显微粉红色)5ml,照电位滴定法(通则0701),用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于12.51mg的C2H7NO3S。
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