Recombinant Human Plasminogen
该重组蛋白通常在大肠杆菌或酵母等表达系统中生产，其结构包含多个Kringle结构域和一个丝氨酸蛋白酶结构域，分子量约为92 kDa。在体内，它主要通过组织型纤溶酶原激活物（t-PA）或尿激酶型纤溶酶原激活物（u-PA）的特异性切割，被激活转化为具有生物活性的纤溶酶。纤溶酶是纤溶系统的关键酶，能够有效降解血栓中的纤维蛋白和纤维蛋白原，从而发挥溶解血栓、保证血管通畅的生理功能，同时也参与伤口愈合、细胞迁移和组织重塑等多种生理病理过程。
商品介绍：
A-01K100127-50μg | Recombinant Human Plasminogen |
A-01K100127-200ug | Recombinant Human Plasminogen |
A-01K100127-1mg | Recombinant Human Plasminogen |
别称：Plasmin, Plasmin heavy chain A, Plasmin light chain B, Plasminogen, PLG, PLMN_HUMAN
标签：N-terminal His Tag
种属：Human
宿主：E.Coli
表达区间：98-356
分子量：28.4 kDa
应用：Western Blot, ELISA
性状：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
纯度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
检测原理详解：
包被抗体结合
实验开始前，微孔板已预先包被抗人白脂素单克隆抗体。当加入待测样本后，
样本中的人白脂素（Asprosin）会与固相载体上的捕获抗体特异性结合。
形成“夹心复合物”
洗涤去除未结合物质后，加入生物素标记的检测抗体，该抗体与白脂素分子的另一表位结合，
形成“固相抗体—抗原—检测抗体”三明治结构。
酶促显色反应
随后加入?辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，与生物素检测抗体结合。
最后加入TMB显色底物，在HRP催化下产生蓝色产物，反应终止后变为黄色。
浓度定量分析
黄色深浅与样本中白脂素含量成正比，通过酶标仪在450nm波长处测定吸光度（OD值），
并根据标准曲线计算出样本中白脂素的浓度。
公司正在出售的产品：
高尔基体转运蛋白1A抗体 | PE标记人TDT单克隆抗体 |
转录因子同源蛋白Nkx3.1抗体 | P11-12显色（SULFO ORANGE）指示溶液 |
突触结合蛋白11抗体 | 清理缓冲液 |
FAM124A蛋白抗体 | 石蜡切片组织PAR-2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
冰冻切片切片组织真菌高碘酸希尔（PAS）法染色试剂盒 | 冰冻切片组织ER BETA 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
组织脂蛋白脂酶活性比色法定量检测试剂盒 | 化妆品甘素（dulcin）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
重组腺病毒包装试剂盒 | 钠钾离子转运蛋白1抗体 |
细菌尼罗红染色试剂盒 | 蛋白质flightless-1同源物抗体 |
组织甘油-3-磷酸脱氢酶-1（Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-1）活性光谱法定量检测试剂盒 | 异质核糖核蛋白Q抗体 |
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AF680标记的胚胎干细胞关键蛋白抗体 | 甲基转移酶样蛋白10抗体 |
Recombinant Mouse IL36 beta | Recombinant Mouse RANKL |
实验步骤：
1. 基因克隆与表达载体构建
从人类FBN1基因C端序列中扩增Asprosin编码片段（约140aa）。
将目的片段插入原核表达载体，确保带有?N端或C端His标签，便于后续纯化。
转化至?感受态细胞，筛选阳性克隆并测序验证。
2. 重组蛋白诱导表达
取阳性菌落接种于LB培养基（含氨苄青霉素），37℃振荡培养过夜。
次日按1:100比例转接至新鲜LB培养基，37℃培养至OD600达0.6–0.8。
加入IPTG至终浓度0.1–1.0 mM，16–25℃诱导表达6–12小时（低温诱导有助于可溶性达）。
4℃、8000×g离心10分钟收集菌体，弃上清，-20℃保存备用。
3. 菌体裂解与蛋白提取
将菌体沉淀重悬于裂解缓冲液（如PBS + 1% Triton X-100 + 蛋白酶抑制剂），超声破碎
（冰浴条件下，每次30秒，共6–10次，功率30%）。
4℃、12000×g离心20分钟，收集上清（可溶性蛋白）或沉淀（包涵体蛋白）。
若为包涵体蛋白，需用?洗涤缓冲液（含2M尿素的PBS）洗涤2–3次，去除杂蛋白。
4. 亲和层析纯化（Ni-NTA法）
将含His标签的蛋白溶液（或溶解后的包涵体蛋白，使用含6–8M尿素的缓冲液溶解）上样至?Ni-NTA亲和层析柱。
用?洗涤缓冲液（含20–40mM咪唑）洗去非特异性结合蛋白。
用?洗脱缓冲液（含250–500mM咪唑）梯度洗脱目标蛋白，收集洗脱峰。
透析去除尿素与咪唑（使用PBS或生理缓冲液，4℃过夜，更换3次）。
5. 蛋白复性（针对包涵体蛋白）
若蛋白以包涵体形式表达，需在纯化后进行?梯度复性：
将变性蛋白缓慢加入含?梯度降低尿素（6M → 4M → 2M → 0M）的复性缓冲液中，4℃搅拌过夜。或采用?透析法?逐步去除变性剂。复性后再次离心取上清，检测蛋白活性。
关键字： Plasminogen;Human;E.Coli;
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