重组表达原理：
基因克隆：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。
蛋白纯化：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。
操作要点：
电泳条件：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
转膜参数：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。
抗体选择：
一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。
二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。
显色方式：ECL化学发光法，预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。
产品概述：
该蛋白是20S核心蛋白酶体的β环组成部分，属于蛋白酶体B/T1B家族。作为蛋白酶体的催化亚基之一，PSMB6主要负责肽酰谷氨酰水解活性（也称为酸性后或半胱氨酸蛋白酶样活性），即在酸性氨基酸残基之后切断肽键。它是泛素-蛋白酶体系统（UPS）的关键执行者，负责细胞内大多数蛋白质的降解，在维持蛋白质稳态、调控细胞周期、免疫应答及信号转导中发挥核心作用。研究表明，PSMB6与多种疾病相关，包括癌症（如前列腺癌、肺癌）、神经退行性疾病及炎症反应。其重组蛋白主要用于泛素-蛋白酶体通路机制研究、
产品名称 | Recombinant Human Proteasome 20S beta 6 | 货号 | A-01K100764 |
表达区间 | 35-239 | 分子量 | 22.4 kDa |
规格 | 50μg、200ug、1mg | 种属 | Human |
商品介绍：
产品名称：Recombinant Human Proteasome 20S beta 6
种属：Human
宿主：E.Coli
表达区间：35-239
分子量：22.4 kDa
标签：N-terminal His Tag
性状：Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
纯度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用：Western Blot, ELISA
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
别称：DELTA, LMPY, Macropain delta chain, MGC5169, Multicatalytic endopeptidase complex delta chain, Proteasome (prosome macropain) subunit beta type 6, Proteasome beta 6 subunit, Proteasome catalytic subunit 1, Proteasome delta chain, Proteasome subunit beta 6, Proteasome subunit beta type 6, Proteasome subunit beta type-6, Proteasome subunit delta, Proteasome subunit Y, PSB6_HUMAN, PSMB6
使用前准备：
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖，开盖前应先进行离心，确保粉末沉降至管底。
建议条件：3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机，可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温（避免加热加速溶解），防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解（Reconstitution）
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS（pH 7.4）进行复溶
若用于细胞实验，可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 ?0.1–1.0 mg/mL，此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集，过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次，或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器，以免破坏蛋白空间结构，导致活性丧失
储存条件：
冻干粉：储存于-20°C至-80°C，避免反复冻融。
复溶后：储存于2°C至8°C，有效期约1个月；长期存储建议分装后置于-20°C至-80°C。
复溶方法：
离心处理：使用前离心收集冻干粉于管底。
复溶缓冲液：加入无菌PBS（含0.1% BSA）或去离子水，轻轻吹打混匀，避免涡旋震荡。
浓度建议：复溶后蛋白浓度保持在0.1-1.0 mg/mL，分装保存以减少冻融损伤。
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应用范围：
免疫研究：体外评估抗病毒或抗菌免疫应答，分析炎症反应机制。
细胞培养：添加至细胞培养基中，研究其对巨噬细胞活化的影响。
功能实验：用于中和实验或信号通路研究（如JAK-STAT通路）。
关键字： Proteasome 20S beta ;Human;E.Coli;
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