Recombinant Human SNF5
该蛋白是SWI/SNF(又称BAF)染色质重塑复合物的核心亚基,作为进化上高度保守的肿瘤抑制因子,其核心功能是利用ATP水解的能量,通过破坏DNA与组蛋白的连接来改变核小体结构,从而调控基因转录的可及性。SNF5在细胞内充当“分子支架”和“靶向导航”,不仅对于维持SWI/SNF复合物的完整性至关重要,还通过与多种转录因子及病毒蛋白相互作用,被募集到特定基因启动子区域(如CSF1、c-Myc等),参与调控细胞周期、增殖、分化及抗病毒活性。研究表明,SNF5在多种癌症(如恶性横纹肌样瘤、非小细胞肺癌等)
商品介绍:

A-01K101444-50μg | Recombinant Human SNF5 |
A-01K101444-200ug | Recombinant Human SNF5 |
A-01K101444-1mg | Recombinant Human SNF5 |
别称:BAF47, BRG1-associated factor 47, hSNF5, INI1, Integrase interactor 1 protein, Malignant rhabdoid tumor suppressor, RDT, RTPS1, Sfh1p, SMARCB1, SNF5 homolog, SNF5_HUMAN, SNF5L1, Snr1, Sucrose nonfermenting yeast homolog like 1, SWI/SNF complex component SNF5, SWI/SNF-related matrix-associated actin-dependent regulator of chromatin subfamily B member 1, SWI10, Transcription factor TYE4
标签:N-terminal His Tag
种属:Human
宿主:E.Coli
表达区间:141-376
分子量:25.9 kDa
应用:Western Blot, ELISA
性状:Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
纯度:Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
检测原理详解:

包被抗体结合
实验开始前,微孔板已预先包被抗人白脂素单克隆抗体。当加入待测样本后,
样本中的人白脂素(Asprosin)会与固相载体上的捕获抗体特异性结合。
形成“夹心复合物”
洗涤去除未结合物质后,加入生物素标记的检测抗体,该抗体与白脂素分子的另一表位结合,
形成“固相抗体—抗原—检测抗体”三明治结构。
酶促显色反应
随后加入?辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,与生物素检测抗体结合。
最后加入TMB显色底物,在HRP催化下产生蓝色产物,反应终止后变为黄色。
浓度定量分析
黄色深浅与样本中白脂素含量成正比,通过酶标仪在450nm波长处测定吸光度(OD值),
并根据标准曲线计算出样本中白脂素的浓度。
公司正在出售的产品:
干扰素调节因子6抗体 | PerCP-Cy5.5标记人CD23单克隆抗体 |
转录调节因子C/EBPδ抗体 | AF680标记的磷酸化一氧化氮合成酶3(内皮型)抗体 |
丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶4抗体 | 酯酶(CHE)定量检测试剂盒 |
磷酸化氨基末端激酶2抗体 | S腺苷同型半胱(SAH或AdoHcy)酶连续循环比色法定量检测试剂盒 |
?基质金属1抑制剂 | 细胞P27蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 |
OXALATE(钾盐)血液抗凝液 | 冰冻切片抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性染色试剂盒 |
磷酸二酯酶5A(Phosphodiesterase 5A) | α-1抗胰蛋白酶抗体 |
细胞络磷酸酶(TP)活性荧光定量检测试剂盒 | His 结构域内含酪氨酸磷酸酶蛋白抗体 |
多糖/多酚植物组织蛋白制备预处理试剂盒 | FCRL6蛋白抗体 |
载玻片细胞FSH-BETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 脉周蛋白1抗体(胃癌抗原蛋白Ga50) |
通用型马原虫性脑脊髓炎(Equine Protozoa Myeloencephalitis) | Recombinant Human SNF5«脆性组氨酸三联体抗体 |
重组逆转录病毒稳态表达细胞筛选试剂盒 | 钾氯离子转运蛋白KCC4抗体 |
Recombinant Human USP29 | Recombinant Human ICAD |
实验步骤:
1. 基因克隆与表达载体构建
从人类FBN1基因C端序列中扩增Asprosin编码片段(约140aa)。
将目的片段插入原核表达载体,确保带有?N端或C端His标签,便于后续纯化。
转化至?感受态细胞,筛选阳性克隆并测序验证。
2. 重组蛋白诱导表达
取阳性菌落接种于LB培养基(含氨苄青霉素),37℃振荡培养过夜。
次日按1:100比例转接至新鲜LB培养基,37℃培养至OD600达0.6–0.8。
加入IPTG至终浓度0.1–1.0 mM,16–25℃诱导表达6–12小时(低温诱导有助于可溶性达)。
4℃、8000×g离心10分钟收集菌体,弃上清,-20℃保存备用。
3. 菌体裂解与蛋白提取
将菌体沉淀重悬于裂解缓冲液(如PBS + 1% Triton X-100 + 蛋白酶抑制剂),超声破碎
(冰浴条件下,每次30秒,共6–10次,功率30%)。
4℃、12000×g离心20分钟,收集上清(可溶性蛋白)或沉淀(包涵体蛋白)。
若为包涵体蛋白,需用?洗涤缓冲液(含2M尿素的PBS)洗涤2–3次,去除杂蛋白。
4. 亲和层析纯化(Ni-NTA法)
将含His标签的蛋白溶液(或溶解后的包涵体蛋白,使用含6–8M尿素的缓冲液溶解)上样至?Ni-NTA亲和层析柱。
用?洗涤缓冲液(含20–40mM咪唑)洗去非特异性结合蛋白。
用?洗脱缓冲液(含250–500mM咪唑)梯度洗脱目标蛋白,收集洗脱峰。
透析去除尿素与咪唑(使用PBS或生理缓冲液,4℃过夜,更换3次)。
5. 蛋白复性(针对包涵体蛋白)
若蛋白以包涵体形式表达,需在纯化后进行?梯度复性:
将变性蛋白缓慢加入含?梯度降低尿素(6M → 4M → 2M → 0M)的复性缓冲液中,4℃搅拌过夜。或采用?透析法?逐步去除变性剂。复性后再次离心取上清,检测蛋白活性。
关键字: SNF5;Human;E.Coli;
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