重组蛋白生产流程
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
重组人EIF5A蛋白(Recombinant Human Eukaryotic Translation Initiation Factor 5A)是一种通过基因工程技术在体外表达和纯化的高度保守的翻译调控因子。尽管其名称中包含“翻译起始因子”,但现代研究表明它实际上主要参与翻译的延伸阶段,特别是解决核糖体在合成特定氨基酸序列时的“停滞”问题。作为真核生物中唯一含有特殊氨基酸羟基腐胺素的蛋白质,EIF5A在维持细胞稳态、调控细胞增殖与凋亡中扮演着不可或缺的角色。
产品名称 | Recombinant Human EIF5A规格 | 货号 | A-01K99731 |
表达区间 | 1-154 | 分子量 | 37.4 KDa |
规格 | 50μg、200ug、1mg | 种属 | Human |
商品介绍:
产品名称:Recombinant Human EIF5A规格
种属:Human
宿主:E.Coli
表达区间:1-154
分子量:37.4 KDa

Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
标签:N-terminal His-IF2DI Tag
性状:Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in PBS with 5% trehalose, pH7.4
纯度:Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用:Western Blot, ELISA
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
别称:eIF4D; eIF-4D; eIF5A; EIF-5A; EIF5A1; eIF-5A1; eIF-5A-1; eIF5AI; Eukaryotic initiation factor 5A isoform 1; eukaryotic initiation factor 5A; eukaryotic translation initiation factor 5A; eukaryotic translation initiation factor 5A-1; MGC104255; MGC99547; Rev-binding Factor
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 ?0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
储存条件:
冻干粉:储存于-20°C至-80°C,避免反复冻融。
复溶后:储存于2°C至8°C,有效期约1个月;长期存储建议分装后置于-20°C至-80°C。
复溶方法:
离心处理:使用前离心收集冻干粉于管底。
复溶缓冲液:加入无菌PBS(含0.1% BSA)或去离子水,轻轻吹打混匀,避免涡旋震荡。
浓度建议:复溶后蛋白浓度保持在0.1-1.0 mg/mL,分装保存以减少冻融损伤。
公司正在出售的产品:
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应用范围:
免疫研究:体外评估抗病毒或抗菌免疫应答,分析炎症反应机制。
细胞培养:添加至细胞培养基中,研究其对巨噬细胞活化的影响。
功能实验:用于中和实验或信号通路研究(如JAK-STAT通路)。
关键字: EIF5A;Human;E.Coli;
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