重组蛋白生产流程
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
Recombinant Human HK3 是一种通过大肠杆菌表达系统制备的、带有C端His标签的人源重组己糖激酶3(Hexokinase-3)。作为己糖激酶家族成员,它能催化葡萄糖磷酸化生成葡萄糖-6-磷酸,从而将葡萄糖锁定在细胞内并导向糖酵解途径,其酶活性可被产物葡萄糖-6-磷酸别构抑制。该重组蛋白纯度超过95%,以冻干粉形式提供,主要用于糖代谢及肿瘤代谢重编程等领域的科学研究。
产品名称 | Recombinant Human HK3说明书 | 货号 | A-01K99609 |
表达区间 | 1-61 | 分子量 | 27.1 KDa |
规格 | 50μg、200ug、1mg | 种属 | Human |
商品介绍:
产品名称:Recombinant Human HK3说明书
种属:Human
宿主:E.Coli
表达区间:1-61
分子量:27.1 KDa

Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
标签:N-terminal His-IF2DI Tag
性状:Lyophilized from a 0.2μm filtered solution in PBS with 5% trehalose, pH7.4
纯度:Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用:Western Blot, ELISA
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
别称:Hexokinase 3, hexokinase 3 (white cell), Hexokinase type III, HK III, HK3, HKIII, HXK3
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 ?0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
储存条件:
冻干粉:储存于-20°C至-80°C,避免反复冻融。
复溶后:储存于2°C至8°C,有效期约1个月;长期存储建议分装后置于-20°C至-80°C。
复溶方法:
离心处理:使用前离心收集冻干粉于管底。
复溶缓冲液:加入无菌PBS(含0.1% BSA)或去离子水,轻轻吹打混匀,避免涡旋震荡。
浓度建议:复溶后蛋白浓度保持在0.1-1.0 mg/mL,分装保存以减少冻融损伤。
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应用范围:
免疫研究:体外评估抗病毒或抗菌免疫应答,分析炎症反应机制。
细胞培养:添加至细胞培养基中,研究其对巨噬细胞活化的影响。
功能实验:用于中和实验或信号通路研究(如JAK-STAT通路)。
关键字: HK3;Human;E.Coli;
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