重组肠激酶是一种大肠杆菌重组表达的牛肠激酶轻链亚基,分子量25.8 kDa,氨基酸序列与牛肠激酶轻链一致,具有特异性切割的活性,催化亚基可以特异性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列并沿序列羧基端进行酶切。
本品为采用低内毒素大肠杆菌CleanTAKTM菌株表达的重组肠激酶,内毒素含量极低,无抗生素残留,不使用动物源原材料,适用范围广,纯度高,特异性强,不含其他蛋白酶。本品不含标签,可以在较宽pH范围(4.5~9.5)和较宽温度范围内有效切割融合蛋白;酶切反应使用量少,不影响下游蛋白的应用。
使用说明
工作浓度:
1、推荐25 mM Tris-HCl (pH8.0)体系中含Flag融合蛋白0.1-1 mg/ml (蛋白总量50-100 µg)时,重组肠激酶酶量0.1-0.2U,25 ℃酶切过夜或16-24h。注:不建议37 ℃条件下酶切,可能会有非特异性酶切出现。
2、4 ℃低温酶切时,需要将酶切时间延长至48-64h,或增加2-3倍酶量。
失活或抑制:常见影响酶活的因素有>2 M尿素,>200 mM NaCl,>20 mMβ-ME,>0.1% SDS,>50 mM咪唑或>5%甘油。
产品用途
从N-末端和Met-N-末端融合蛋白中去除融合标签;
蛋白质修饰和氨基酸序列测定。
产品优势
内毒素含量极低:低内毒素大肠杆菌CleanTAKTM 菌株表达的重组肠激酶内毒素含量极低;
无动物源性: 重组蛋白,不含任何动物来源原料;
质量稳定: 批量生产,产品批次间无差异;
纯度高: 比活高,无非特异性切割,宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
恒敬合创生物医药(浙江)有限公司
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