人瘢痕疙瘩成纤维细胞是从瘢痕疙瘩组织中分离得到的成纤维细胞,具有过度增殖和大量分泌胶原蛋白等细胞外基质的特性,导致瘢痕组织持续增生、超出原损伤范围,是瘢痕疙瘩形成和发展的关键细胞,研究其生物学特性和调控机制对瘢痕疙瘩的治疗有重要意义。
产品名称 人瘢痕疙瘩成纤维细胞
英文名称:Human Keloid Fibroblast cells
货号:YS-01X7680
组织来源 皮肤组织
种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介:实验室分离的人瘢痕疙瘩成纤维细胞采用先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测:实验室分离的人瘢痕疙瘩成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3-5代左右
消化液:0.25%胰蛋白酶人瘢痕疙瘩成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

人瘢痕疙瘩成纤维细胞分离自皮肤瘢痕疙瘩组织;瘢痕疙瘩,俗称疤痕疙瘩,是皮肤伤口愈合或不明原因所致皮肤损伤愈合后所形成的过度生长的异常瘢痕组织,目前学术界认为各种原因导致的瘢痕如具有以下特点,可诊断为瘢痕疙瘩:①病变超过原始皮肤损伤范围;②呈持续性生长;③高起皮肤表面、质硬韧、颜色发红的结节状、条索状或片状肿块。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的瘢痕疙瘩成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。瘢痕疙瘩成纤维细胞同正常皮肤成纤维细胞在形态上没有表现出明显的差异。瘢痕疙瘩成纤维细胞生长同正常皮肤成纤维细胞的生长没有明显的差别。癜痕成纤维细胞对血清的依赖性低于正常皮肤成纤维细胞。

细胞组成:瘢痕疙瘩病变组织异常活化成纤维细胞
形态结构:梭形肥大,增殖过度,排列紊乱,胞质丰富
分子标记:Vimentin、Collagen Ⅰ/Ⅲ、TGF-β 受体高表达
功能特性:胞外基质过度合成、异常增殖、侵袭性生长,介导瘢痕过度增生

异常增殖并过量合成胶原,引发瘢痕过度增生
分泌促纤维化因子,持续驱动组织纤维化进程
抗凋亡特性强,导致瘢痕组织持续增生不消退
介导局部慢性炎症,维持瘢痕疙瘩病理微环境

1.无菌环境下取出组织,用预冷PBS快速冲洗2次去除表面血污,直接剪至1mm³左右小块
2.将组织块加入混合消化液,37℃恒温振荡消化20-25分钟,期间每隔10分钟轻轻摇晃一次
3.消化结束后,直接加入预热的完全培养基终止消化,用200目细胞筛一次性过滤
4.无需离心,直接将滤液接种至预热的包被培养瓶中,放入37℃、5%CO₂培养箱
5.24小时后首次半换液,仅更换一半培养基,避免刚贴壁的细胞脱落
6.此后每2-3天换液一次,待细胞融合度达到80%左右时,直接用0.25%胰蛋白酶室温消化1-2分钟,加入培养基终止后轻轻吹打,按1:2比例直接传代,无需离心收集细胞

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关键字: 人瘢痕疙瘩成纤维细胞;皮肤组织;成纤维细胞样;
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