人骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)

人骨髓未成熟树突状细胞是树突状细胞的前体阶段，具有强大的抗原摄取能力，但抗原呈递能力较弱。细胞呈圆形或半树突状形态，低表达MHC-Ⅱ类分子和共刺激分子，表达CD1a、CD11c等标志物。在摄取抗原后可成熟为成熟DC细胞，启动免疫应答。常用于研究树突状细胞分化成熟机制、免疫耐受诱导及肿瘤免疫治疗的细胞疫苗制备。
产品名称 人骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)

英文名称：Human Bone Marrow Immature Dendritic Cells

货号：YS-01X8292

组织来源 骨髓

种属 人

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的人骨髓未成熟DC细胞采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的人骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)经CD86免疫荧光鉴定、细 胞 形态等综合鉴定，纯度可达80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：半贴壁半悬浮

细胞形态：圆形、梭形、多角形，形态多样

传代特性：属于高度分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液：0.25%胰蛋白酶人骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

人骨髓树突状细胞分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓DC细胞是由骨髓单核细胞诱导而成的；树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞，典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落，细胞大而形态不规则，表面皱褶多，亦可见少量短刺状突，胞内细胞器丰富并可见吞噬泡，具有较强的迁移能力，伴随有部分未完全诱导成的单核细胞，贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成，多数呈悬浮生长， 细胞呈圆形，细胞体积进一步增大，表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 )，伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志，主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子，进而激活T淋巴细胞，诱导免疫应答，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节；未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力，但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答，不能激活T细胞的第二信号，可导致T细胞无能，从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低，一般在30%以下。

细胞组成：骨髓分化未成熟树突状细胞，免疫感应前期细胞

形态结构：胞体偏小，突起短小稀少，圆形 / 类圆形，贴壁能力较弱

分子标记：CD11c 低表达、MHC-Ⅱ 低表达、CD209、TLR4

功能特性：强抗原摄取与吞噬能力，炎症刺激下可成熟分化，维持外周免疫耐受

强摄取、识别抗原能力，负责机体抗原捕获与处理

维持外周免疫耐受，避免自身免疫异常激活

感知微环境信号，成熟分化后启动特异性免疫

调控局部免疫微环境，平衡炎症与免疫稳态

1.无菌条件下取出组织，用预冷PBS快速冲洗2次去除血污

2.直接将组织剪成1mm³左右的小块，无需反复清洗

3.加入适量0.1%Ⅳ型胶原酶，37℃恒温振荡消化15分钟，期间每隔5分钟轻轻摇晃一次

4.消化结束后无需离心，直接加入等体积预热的完全培养基终止消化

5.用10ml吸管轻轻吹打组织块10-15次，使细胞从组织块中游离出来

6.将含有细胞与组织块的混合悬液直接接种至预先涂布胶原的培养瓶中

7.放入37℃、5%CO₂培养箱培养，24小时内不要晃动培养瓶

8.24小时后更换一半新鲜培养基，去除未贴壁的死细胞与组织残渣