人角膜上皮细胞

人角膜上皮细胞是覆盖在角膜外表面的多层上皮细胞，构成角膜的物理屏障，参与角膜的防御和修复。细胞呈复层扁平形态，表达细胞角蛋白3、细胞角蛋白12和紧密连接蛋白标志物，可分泌泪膜成分维持角膜湿润。其损伤或功能异常与角膜炎、角膜上皮缺损、干眼等疾病相关，常用于研究角膜上皮生理病理、损伤修复机制及眼科疾病药物研发。
产品名称 人角膜上皮细胞

英文名称：Human Corneal Epithelial cells

货号：YS-01X7406

组织来源 眼角膜组织

种属 人

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的人角膜上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的人角膜上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%胰蛋白酶人角膜上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

人角膜上皮细胞分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。其主要功能如下：①角膜是唯一的无血管的组织，具有透明的特性和合成许多蛋白的功能，分三层细胞层，外层即是上皮细胞；②角膜上皮细胞能参与先天性免疫，能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统；③角膜上皮细胞能高效表达醛脱氢酶。角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是极为重要的手段，常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。

细胞组成：角膜表层复层上皮细胞，眼表第一道屏障细胞

形态结构：多边形鳞状上皮，分层生长，表层细胞扁平，基底层立方形

分子标记：CK3/12、p63、Integrin β4、E-Cadherin

功能特性：抵御外界机械损伤、微生物感染，维持眼表湿润，参与角膜上皮损伤快速修复

构成角膜表层屏障，阻挡病菌、异物、紫外线损伤

不断增殖更新，快速修复角膜表层擦伤与轻微损伤

分泌保护性因子，维持眼表湿润与角膜生理稳态

参与干眼、角膜炎等眼表疾病的炎症应答

1.无菌取出组织，预冷 PBS 反复冲洗，去除血迹、气管及杂质组织。

2.将组织剪碎至 1mm³ 细小组织块，PBS 反复漂洗，去除漂浮杂质与死细胞。

3.加入混合消化液（胰酶 + 胶原酶），37℃水浴消化 20~30min，间断轻柔吹打；血清培养基加入终止消化。

4.细胞悬液过 100μm 滤网，收集滤液，300g 离心 5min，弃上清，PBS 重悬洗涤一次。

5.完全培养基重悬细胞，调整合适密度接种于培养皿；置于 37℃、5% CO₂培养箱静置培养。

6.培养 24h 后首次换液，利用差速贴壁特性：成纤维细胞贴壁快，去除未贴壁上皮等杂细胞；之后每 2~3 天换液一次。