大鼠DNA损伤诱导转录因子4样蛋白(DDIT4)elisa试剂盒
商品属性：
英文名称 | RatDDIT4 elisa kit | 灵敏度 | 0.15625ng/mL |
检测范围 | 0.3125ng/mL-20ng/mL | 货号 | PR9805 |
核心参数：
检测原理：双抗体夹心法酶联免疫吸附试验，包被特异性抗体，结合样本中靶标蛋白，再加入酶标二抗，底物显色，颜色深浅与样本中 DDIT4 含量呈正相关。
种属反应性：仅适用于大鼠样本，与小鼠、人、兔等其他种属无交叉反应。
样本类型：血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆、细胞裂解液。
检测时间：整体操作 3.5~4h（不含样本前处理）。
保存条件：试剂盒未开封 2~8℃冷藏保存，禁止冷冻；开封后板条密封 2~8℃可存放 1 个月。
特异性：与 DDIT4 天然及重组蛋白特异性结合，同家族同源蛋白无明显交叉反应。
夹心法数据：
| 校准品浓度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.713 | 1.568 | 0.837 | 0.495 | 0.292 | 0.156 | 0.092 | 0.042 |
| 校正OD值 | 2.672 | 1.526 | 0.796 | 0.453 | 0.250 | 0.115 | 0.050 | 0.000
|
夹心法标曲：
产品定义：
这是一种基于酶联免疫吸附试验（ELISA）技术的检测工具，用于定量检测大鼠样本（如血清、血浆、组织匀浆等）中DNA损伤诱导转录因子4样蛋白（DDIT4）的含量。该蛋白是一种应激反应蛋白，在细胞应对营养缺乏、低氧、DNA损伤等应激状态时表达上调，通过抑制mTOR信号通路来调节细胞生长、增殖和存活，在肿瘤发生、神经退行性疾病等病理过程中发挥重要作用。试剂盒通常采用双抗体夹心法，通过特异性抗体捕获样本中的DDIT4，再结合酶标记的检测抗体，通过底物显色反应进行定量分析。
试剂准备:
平衡：所有试剂回温至室温（20–25℃）。
洗涤液（1×）：30 mL 25× 浓缩洗液 + 720 mL 去离子水，混匀，2–8℃可存 1 个月。
标准品稀释：
每瓶标准品加1 mL稀释液，静置 15 min，轻柔混匀（避免气泡），得最高浓度 S7。
准备 7 个 EP 管，各加250 μL稀释液，倍比稀释：
S7：原液（如 160 μg/L）
S6：250 μL S7 + 250 μL 稀释液
S5 至 S1 依次稀释
S0：稀释液（空白对照）
生物素化抗体（1×）：按 1:100 稀释（如 12 μL 100× 浓缩 + 1.2 mL 稀释液），现配现用。
SAV‑HRP（1×）：按 1:100 稀释，现配现用，避光。
常见问题
高背景：洗板不足、SAV‑HRP 浓度过高、孵育温度过高 / 时间过长、污染。
标准曲线线性差：标准品稀释错误、孵育时间不准、读数超时。
样品值偏低：样品降解、稀释倍数过高、加样误差。
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