兔结肠平滑肌细胞

商品属性

细胞简介

兔结肠平滑肌细胞分离自结肠组织；结肠在右髂窝内续于盲肠，在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母“M”，将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为：黏膜（上皮层、固有层、黏膜肌层），黏膜下层（疏松结缔组织），肌层（内环形、外纵行两层平滑肌），外膜（纤维膜或浆膜）。结肠平滑肌细胞主要分布于黏膜肌层和肌层的内环形、外纵行平滑肌；结肠运动少而缓慢，对刺激的反应也较迟缓。结肠平滑肌在食物消化与吸收、肠道运动和物质分泌、诱发全身炎症反应以及细胞内信号转导途径等研究中起着重要的作用。结肠平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态：大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。结肠平滑肌运动活性受到神经递质、胃肠激素和药物等因素的调节。随着现代胃肠动力学研究的进展，对胃肠运动的研究已从器官、组织水平发展到细胞、分子水平，要求在胃肠道单个平滑肌细胞标本上来完成各种电生理、药理和分子生物学等实验。体外培养细胞，由于影响因素单一，是研究细胞功能以及相应的细胞信号转导机制的基础。
产品信息

产品名称 兔结肠平滑肌细胞

组织来源 结肠组织

种属 兔
产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的兔结肠平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的兔结肠平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶兔结肠平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
生物特征

细胞组成：结肠肌层环状 / 纵行平滑肌分化细胞，均质肌细胞群

形态结构：长梭形、束状平行排列，融合性生长，胞质富含肌丝

分子标记：α-SMA、Desmin、Calponin、SM22α

功能特性：结肠蠕动、平滑肌收缩舒张；调控肠道运动、物质推送与内脏动力

核心功能

1. 介导结肠收缩与舒张，推动肠道蠕动及内容物转运

2. 响应神经与体液信号，调控肠道动力与排空节律

3. 损伤或炎症下表型转化，参与肠道重构与功能异常

4. 肠易激综合征、肠道动力障碍、平滑肌病变研究
原代细胞传代操作指南

传代时机判断

当细胞融合度达到70%-80%时进行传代，此时细胞活力最佳，避免过度融合导致接触抑制

若细胞生长缓慢或形态变差，可提前传代调整密度

具体操作步骤

预处理：提前预热培养基、胰蛋白酶和PBS，准备好无菌离心管、移液管等耗材

消化细胞：吸弃旧培养基，用PBS轻轻冲洗细胞表面1-2次，去除残留血清；加入适量胰蛋白酶（覆盖细胞表面即可），37℃孵育1-3分钟，期间在显微镜下观察，待细胞边缘收缩、变圆且开始脱落时终止消化

终止消化与收集：加入等量含血清的培养基中和胰蛋白酶，用移液管轻轻吹打培养瓶壁，使细胞完全脱落形成细胞悬液；将细胞悬液转移至离心管，以1000rpm离心5分钟

重悬与接种：弃上清，用预热的完全培养基重悬细胞，按1:2-1:3的比例接种至新的培养瓶，补充培养基后轻轻摇匀，放入培养箱继续培养

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