兔外周血树突状细胞 (未成熟DC细胞)

兔外周血树突状细胞（未成熟DC细胞）是成熟DC细胞的前体阶段，主要存在于兔外周血和外周组织中。它具有强大的抗原摄取能力，能够通过吞噬、胞饮等方式摄取病原体、抗原物质等。当摄取到抗原后，未成熟DC细胞会逐渐成熟，迁移到次级淋巴器官，将抗原呈递给T细胞，启动免疫应答。在成熟过程中，其表面分子表达会发生变化，共刺激分子和抗原呈递分子的表达水平显著提高。该细胞可通过体外培养外周血单个核细胞，在特定细胞因子条件下诱导分化而来。
产品名称 兔外周血树突状细胞 (未成熟DC细胞)

英文名称：Rabbit Peripheral Blood Immature Dendritic Cells

货号：YS-01X8446

组织来源 外周血

种属 兔

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的兔外周血未成熟DC细胞采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的兔外周血树突状细胞(未成熟DC细胞)经CD86免疫荧光鉴定、细胞形态：等综合鉴定，纯度可达80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：半贴壁半悬浮

细胞形态：圆形、梭形、多角形，形态多样

传代特性：属于高度分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液：0.25%胰蛋白酶兔外周血树突状细胞 (未成熟DC细胞)体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

兔外周血DC细胞分离自外周血，由外周血单核细胞诱导而成的；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次提出外周血这一新概念。树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞，典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落，细胞大而形态不规则，表面皱褶多，亦可见少量短刺状突，胞内细胞器丰富并可见吞噬泡，具有较强的迁移能力，伴随有部分未完全诱导成的单核细胞，贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成，多数呈悬浮生长， 细胞呈圆形，细胞体积进一步增大，表面大量粗细不等的树枝样突起（高倍镜或者电镜下可观察到 ），伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志，主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物（MHC）以及CD80、CD86等共刺激分子，进而激活T淋巴细胞，诱导免疫应答，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节；未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力，但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答，不能激活T细胞的第二信号，可导致T细胞无能，从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低，一般在30%以下。

细胞组成：外周血来源未分化幼稚型树突状细胞

形态结构：胞体偏小，突起短而少，形态偏圆润

分子标记：CD11c、低表达 CD80/CD86、低 MHC-II

功能特性：高抗原摄取能力，感知炎症信号，受刺激后分化为成熟 DC

强抗原摄取与加工能力，感知外源信号

低免疫激活能力，维持外周免疫耐受

迁移至淋巴器官，分化成熟启动免疫

监测组织微环境，早期识别病原体入侵

1.提前配制含10%胎牛血清、双抗的完全培养基，置于37℃温箱预热

2.同时准备无菌的手术器械、离心管、消化液（如0.25%胰蛋白酶）、PBS缓冲液，全部放入无菌操作台

3.无菌环境下取出目标组织，用PBS冲洗掉血污后剪至1mm³大小

4.加入消化液，37℃水浴消化15-20分钟，期间每隔5分钟轻轻摇晃

5.消化结束后立即加入等体积完全培养基终止消化，用无菌筛网过滤细胞悬液

6.将过滤后的细胞悬液以1000rpm离心5分钟，弃上清后用预热的完全培养基重悬细胞

7.直接将细胞悬液接种至提前铺好基质的培养瓶/皿中，放入37℃、5%CO₂培养箱