人磷酸化核转录因子p65(pNF-KB P65)elisa试剂盒
商品属性：
英文名称 | human pNF-KB P65 elisa kit | 灵敏度 | 0.15625ng/ml |
检测范围 | 0.3125ng/ml-20ng/ml | 货号 | PH21639 |
核心参数：
检测原理：双抗体夹心 ELISA 法（磷酸化特异）
种属反应性：仅人源反应
样本类型：血清、血浆、细胞裂解液、组织匀浆
检测时间：2.5–3h
保存条件：2–8℃密封防潮
特异性：仅识别磷酸化 p65，非磷酸化及 NF-κB 家族亚基无交叉
板内 / 板间变异系数：板内 CV＜8%，板间 CV＜10%
夹心法数据：
| 校准品浓度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.713 | 1.568 | 0.837 | 0.495 | 0.292 | 0.156 | 0.092 | 0.042 |
| 校正OD值 | 2.672 | 1.526 | 0.796 | 0.453 | 0.250 | 0.115 | 0.050 | 0.000
|
夹心法标曲：
产品定义：
用于检测人样本中磷酸化核转录因子p65（pNF - KB P65）水平的试剂盒。NF - KB信号通路在免疫应答、炎症反应、肿瘤发生等过程中发挥重要作用，pNF - KB P65反映了该通路的活化状态，可用于相关疾病的发病机制研究和药物研发。
操作步骤:
试剂盒平衡：实验前20分钟将试剂盒从冰箱取出，平衡至室温（20-25℃）
板条准备：从铝箔袋中取出所需板条，剩余板条密封放回2-8℃保存
加样
标准品孔：加入不同浓度标准品50μL（浓度通常为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL）
样本孔：先加样本稀释液40μL，再加待测样本10μL（最终稀释5倍）
空白孔：不加任何液体
加酶标抗体：除空白孔外，每孔加入HRP标记的检测抗体100μL
温育：封板膜封板后，37℃温育60分钟
洗涤
弃去孔内液体，吸水纸上拍干
每孔加满洗涤液（350μL），静置1分钟后弃去，重复洗板5次
最后一次洗涤后彻底拍干孔内液体
显色：每孔加入显色剂A、B各50μL，轻轻混匀，37℃避光显色15分钟
终止反应：每孔加入终止液50μL，蓝色立即转为黄色
读数：15分钟内用酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值
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