这是一种基于ELISA技术的检测工具，用于定量检测人样本中死骨片1-泛素结合蛋白P62（SQSTM1-p62）的含量。SQSTM1-p62在自噬过程中负责识别和结合泛素化的蛋白质，并将其运送到自噬体中进行降解，其表达水平可反映细胞自噬的活性，与肿瘤、神经退行性疾病等疾病的发生发展相关。试剂盒采用双抗体夹心法，通过特异性抗体捕获样本中的SQSTM1-p62，再结合酶标记的检测抗体，通过底物显色反应进行定量分析。
产品名称 | 人死骨片1-泛素结合蛋白P62(SQSTM1-p62)elisa试剂盒 | 灵敏度 | 0.15625ng/mL |
英文名称 | human SQSTM1-p62 elisa kit | 货号 | PH20471 |
检测范围 | 0.3125ng/mL-20ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夹心法数据：
以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
| 校准品浓度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.713 | 1.568 | 0.837 | 0.495 | 0.292 | 0.156 | 0.092 | 0.042 |
| 校正OD值 | 2.672 | 1.526 | 0.796 | 0.453 | 0.250 | 0.115 | 0.050 | 0.000
|
夹心法标曲：
核心参数：
检测原理：双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）
种属反应性：仅与人源 SQSTM1-p62 特异性反应
样本类型：血清、血浆、组织匀浆、细胞自噬相关裂解液
检测时间：全程 3.5–4.5h
保存条件：2–8℃冷藏，禁止冷冻，试剂避光保存
特异性：特异性识别 p62/SQSTM1 复合物，无泛素家族非特异结合
板内 / 板间变异系数：板内 CV＜8%，板间 CV＜10%
操作流程:
加样
设置标准品孔、样本孔和空白孔：标准品孔加入不同浓度的标准品50μL；样本孔先加样本稀释液40μL，再加待测样本10μL（样本最终稀释5倍，结果需乘以5）；空白孔不加任何液体
温育
除空白孔外，每孔加入HRP标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃温育60分钟
洗板
弃去孔内液体，在吸水纸上拍干；每孔加满洗涤液，静置1分钟后弃去，重复洗板5次；最后一次洗板后需将孔内液体彻底拍干
显色
每孔加入底物液A、B各50μL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟
终止反应
每孔加入终止液50μL，此时蓝色会立即转为黄色
读数
以空白孔调零，15分钟内用酶标仪测定450nm波长下各孔的吸光度（OD值）
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