植酸(Saponin )含量试剂盒说明书
微量法 100管/96样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
植酸又称肌酸、环己六醇六全-二氢磷酸盐,它主要存在于植物的种子、根干和茎中,其中以豆科植物的种子、谷物的麸皮和胚芽中含量最高。植酸作为螯合剂、抗氧化剂、保鲜剂、水的软化剂、发酵促进剂、金属防腐蚀剂等,广泛应用于食品、医药、油漆涂料、日用化工、金属加工、纺织工业、塑料工业及高分子工业等行业领域。
测定原理:
磺基水杨酸-氯化铁溶液显紫红色,在500nm下有最大吸光值。在pH6.0-6.5的环境下,植酸和铁离子结合使溶液颜色变淡,测定吸光度的降低来检测植酸含量。
试剂的组成和配制:
产品名称 | OT019-100T/96S | Storage |
试剂一:液体 | 100ml | 4℃ |
试剂二:液体 | 50ml | 4℃ |
试剂三:液体 | 100ml | 4℃ |
试剂四:液体 | 12ml | 4℃避光 |
说明书 | 一份 |
需自备仪器和用品:
酶标仪、烘箱、水浴锅、可调式移液器、96孔板、金属震荡仪、蒸馏水
植酸提取:
样本烘干,粉碎过筛,称取0.05g,加入1ml试剂一,震荡提取2h;8000g,25℃离心10min,取上清0.5ml,加入0.5ml试剂二,混匀后4℃静置2h,离心取上清待测。
测定步骤:
1、酶标仪预热30min以上,调节波长至500nm。
2、测定管:取100μl上清,加入900μl试剂三,混匀后取180μl加入EP管中,再加入60μl试剂四,充分混匀后,5000g 25℃离心 10min,取 200μL加入96孔板,500nm下测定吸光值A1。
3、空白液配制:取0.5ml试剂一和0.5ml试剂二混匀。
4、空白管:取100μl空白液,加入900μl试剂三,混匀后取180μl加入96孔板,再加入60μl试剂四,充分混匀后,5000g 25℃离心 10min,取 200μL 加入96孔板,500nm 下测定吸光值A2。计算ΔA=A2-A1。
空白管只要做一管。
植酸含量计算:
标准状态下的回归曲线为:y =0.25x + 0.0854,R2 = 0.9982;X 为植酸钠标准品浓度(μmol/mL),y 为吸光值 ΔA(A2-A1)。
植酸含量(mg/g 干重)=(ΔA-0.0854)÷0.25×V 样总÷W×660÷1000
=5.28×(ΔA-0.0854)÷W
V 样总:加入提取液总体积,2mL;W:样本干重,g;660,植酸分子量
注意事项:
若ΔA 高于 0.3,说明样本植酸浓度过高,需要加空白液适当稀释,并在计算结果中乘以相应的稀释倍数。
关键字: 植酸含量测试盒;植酸含量检测;
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