采用双抗体夹心法：用纯化的OVOL1抗体包被微孔板，样本中的OVOL1抗原与包被抗体结合后，再加入HRP标记的OVOL1检测抗体。形成的夹心复合物经过洗涤后，加入底物产生显色反应，颜色深浅与样本中OVOL1浓度成正比，通过酶标仪读取结果并计算浓度，反映上皮细胞分化调控状态。
产品名称 | 人Ovol1蛋白(OVOL1)elisa试剂盒 | 灵敏度 | 0.078125ng/ml |
英文名称 | human OVOL1 elisa kit | 货号 | PH22264 |
检测范围 | 0.15625ng/ml-10ng/ml | 品牌 | 派瑞曼 |
夹心法数据：
以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夹心法标曲：
核心参数：
检测原理：双抗体夹心法免疫显色定量
种属反应性：仅适配人样本检测
检测时间：2.5~3h
保存条件：2~8℃常规冷藏
特异性：无 OVOL 家族同源蛋白交叉反应
板内变异系数：＜8%
操作步骤:
试剂盒平衡：实验前20分钟将试剂盒从冰箱取出，平衡至室温（20-25℃）
板条准备：从铝箔袋中取出所需板条，剩余板条密封放回2-8℃保存
加样
标准品孔：加入不同浓度标准品50μL（浓度通常为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL）
样本孔：先加样本稀释液40μL，再加待测样本10μL（最终稀释5倍）
空白孔：不加任何液体
加酶标抗体：除空白孔外，每孔加入HRP标记的检测抗体100μL
温育：封板膜封板后，37℃温育60分钟
洗涤
弃去孔内液体，吸水纸上拍干
每孔加满洗涤液（350μL），静置1分钟后弃去，重复洗板5次
最后一次洗涤后彻底拍干孔内液体
显色：每孔加入显色剂A、B各50μL，轻轻混匀，37℃避光显色15分钟
终止反应：每孔加入终止液50μL，蓝色立即转为黄色
读数：15分钟内用酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值
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