采用间接法：将重组人OX40蛋白包被于酶标板微孔，样本中的OX40抗体与包被蛋白结合后，加入HRP标记的抗人IgG抗体。经过孵育、洗涤后，加入底物产生显色反应，颜色深浅与样本中OX40抗体的浓度成正比，通过标准曲线计算样本中抗体的滴度，反映免疫激活状态。
产品名称 | 人OX40抗体(OX40 Ab)elisa试剂盒 | 灵敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名称 | human OX40 Ab elisa kit | 货号 | PH22261 |
检测范围 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夹心法数据：
以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夹心法标曲：
核心参数：
检测原理：间接 ELISA 法，包被抗原结合样本抗体，酶标二抗显色测抗体含量
种属反应性：特异性识别人体内 OX40 自身抗体
检测时间：3h
保存条件：2~8℃密封冷藏，避免受潮
特异性：仅识别 OX40 对应抗体，无其他共刺激分子抗体交叉
板内变异系数：＜9%
样本处理与保存方法:
不同样本的处理方式有所差异，处理后需确保样本清澈无沉淀，避免溶血或高血脂样本影响结果：
血清样本
全血标本室温放置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清液检测
短期保存（1周内）可置于4℃，长期保存需分装后-20℃/-80℃冻存，避免反复冻融
血浆样本
选择EDTA或肝素作为抗凝剂，采血后30分钟内于2-8℃环境1000×g离心15分钟，取上清液
保存条件同血清样本
组织匀浆样本
用预冷的PBS（0.01M，pH=7.4）冲洗组织，去除残留血液，称重后剪碎
按1:9的重量体积比加入PBS（如1g组织加9mL PBS，可添加蛋白酶抑制剂），冰上充分研磨或超声破碎
5000×g离心5-10分钟，取上清液检测；未使用的样本分装后冻存
细胞培养上清样本
1000×g离心20分钟，去除细胞碎片及杂质，取上清液检测
若检测细胞内成分，需用PBS稀释细胞悬液至浓度约100万/mL，反复冻融裂解细胞后离心取上清
尿液样本
无菌管收集尿液，2000-3000转/分离心20分钟，取上清液检测；若有沉淀需再次离心
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