采用双抗体夹心法:用纯化的RASAL1抗体包被微孔板,样本中的RASAL1抗原与包被抗体结合后,再加入HRP标记的RASAL1检测抗体。形成的夹心复合物经过洗涤后,加入底物产生显色反应,颜色深浅与样本中RASAL1浓度成正比,通过酶标仪读取结果并计算浓度,反映Ras信号通路负调控和细胞增殖调控状态。
产品名称
人Ras三磷酸鸟苷酶激活样蛋白(RASAL1)elisa试剂盒
灵敏度
0.078125ng/mL
英文名称
human RASAL1 elisa kit
货号
PH21260
检测范围
0.15625ng/mL-10ng/mL
品牌
派瑞曼
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
夹心法标曲:
核心参数:
检测原理:双抗体夹心 ELISA 法定量
种属反应性:人源特异性识别
检测时间:2.5~3h
保存条件:2~8℃保存
特异性:不和 Ras 家族其他激活样蛋白交叉
板内变异系数:<8%操作流程:
加样
设置标准品孔、样本孔和空白孔:标准品孔加入不同浓度的标准品50μL;样本孔先加样本稀释液40μL,再加待测样本10μL(样本最终稀释5倍,结果需乘以5);空白孔不加任何液体
温育
除空白孔外,每孔加入HRP标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃温育60分钟
洗板
弃去孔内液体,在吸水纸上拍干;每孔加满洗涤液,静置1分钟后弃去,重复洗板5次;最后一次洗板后需将孔内液体彻底拍干
显色
每孔加入底物液A、B各50μL,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟
终止反应
每孔加入终止液50μL,此时蓝色会立即转为黄色
读数
以空白孔调零,15分钟内用酶标仪测定450nm波长下各孔的吸光度(OD值)
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上海博湖生物科技有限公司
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