采用双抗体夹心法:针对Sec15蛋白的特异性表位设计配对抗体。捕获抗体包被于酶标板,样本中的Sec15与之结合后,加入HRP标记的检测抗体。经过孵育、洗涤和底物显色后,根据OD值与标准曲线的关系计算样本中Sec15的含量,反映囊泡转运和细胞分泌调控状态。
产品名称
人Sec15蛋白(Sec15)elisa试剂盒
灵敏度
0.078125ng/ml
英文名称
human Sec15 elisa kit
货号
PH20869
检测范围
0.15625ng/ml-10ng/ml
品牌
派瑞曼
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
夹心法标曲:
核心参数:
检测原理:经典双夹心 ELISA 免疫测定
种属反应性:人源囊泡转运蛋白专属识别
检测时间:2.5~3h
保存条件:2~8℃冷藏存放
特异性:无囊泡转运相关蛋白交叉反应
板内变异系数:<8%操作步骤:
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液。静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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