大鼠腺苷酸环化酶8(AC-8)elisa试剂盒
商品属性：
英文名称 | RatAC-8 elisa kit | 灵敏度 | 0.078125ng/mL |
检测范围 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 货号 | PR10747 |
核心参数：
检测原理：双抗体夹心法 ELISA
种属反应性：大鼠 AC8 亚型特异性识别
检测时间：2.5~3h
保存条件：2~8℃低温避光
特异性：不和腺苷酸环化酶其他亚型交叉
板内变异系数：＜8%
夹心法数据：
| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000
|
夹心法标曲：
产品定义：
采用间接竞争法：将腺苷酸环化酶8包被于酶标板微孔，样本中的AC-8与HRP标记的AC-8抗体竞争性结合包被抗原。样本中AC-8浓度越高，与抗体结合的包被抗原越少，最终显色越浅。通过标准曲线计算样本中AC-8的活性浓度，反映cAMP信号通路活性。
操作步骤:
试剂盒平衡：实验前20分钟将试剂盒从冰箱取出，平衡至室温（20-25℃）
板条准备：从铝箔袋中取出所需板条，剩余板条密封放回2-8℃保存
加样
标准品孔：加入不同浓度标准品50μL（浓度通常为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL）
样本孔：先加样本稀释液40μL，再加待测样本10μL（最终稀释5倍）
空白孔：不加任何液体
加酶标抗体：除空白孔外，每孔加入HRP标记的检测抗体100μL
温育：封板膜封板后，37℃温育60分钟
洗涤
弃去孔内液体，吸水纸上拍干
每孔加满洗涤液（350μL），静置1分钟后弃去，重复洗板5次
最后一次洗涤后彻底拍干孔内液体
显色：每孔加入显色剂A、B各50μL，轻轻混匀，37℃避光显色15分钟
终止反应：每孔加入终止液50μL，蓝色立即转为黄色
读数：15分钟内用酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值
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