大鼠组氨酸三聚体核苷结合蛋白2(HINT2)elisa试剂盒
商品属性:

英文名称 | RatHINT2 elisa kit | 灵敏度 | 0.078125ng/mL |
检测范围 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 货号 | PR9244 |
核心参数:

检测原理:双抗体夹心法 ELISA,抗原抗体特异性结合,酶促底物显色,酶标仪比色定量
种属反应性:仅特异性识别大鼠 HINT2,无跨种属交叉反应
检测时间:2.5~3h
保存条件:2~8℃避光密封冷藏,禁止冷冻、避免反复冻融
特异性:不和同源家族核苷结合蛋白发生交叉反应
板内变异系数:<8%
夹心法数据:

| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000
|
夹心法标曲:


产品定义:

该试剂盒采用双抗体夹心法,将纯化的大鼠组氨酸三聚体核苷结合蛋白2(HINT2)抗体包被于微孔板上,形成固相抗体。向微孔中依次加入待检样本和酶标记的HINT2抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在酶的催化下转化为蓝色,再经酸终止反应后变为黄色。颜色的深浅与样本中HINT2的含量呈正相关,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),可计算样本中HINT2的浓度。
操作流程:

加样
设置标准品孔、样本孔和空白孔:标准品孔加入不同浓度的标准品50μL;样本孔先加样本稀释液40μL,再加待测样本10μL(样本最终稀释5倍,结果需乘以5);空白孔不加任何液体
温育
除空白孔外,每孔加入HRP标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃温育60分钟
洗板
弃去孔内液体,在吸水纸上拍干;每孔加满洗涤液,静置1分钟后弃去,重复洗板5次;最后一次洗板后需将孔内液体彻底拍干
显色
每孔加入底物液A、B各50μL,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟
终止反应
每孔加入终止液50μL,此时蓝色会立即转为黄色
读数
以空白孔调零,15分钟内用酶标仪测定450nm波长下各孔的吸光度(OD值)
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