采用双抗体夹心法:针对HEXA蛋白的特异性表位设计配对抗体。捕获抗体包被于酶标板,样本中的HEXA与之结合后,加入HRP标记的检测抗体。经过孵育、洗涤和底物显色后,根据OD值与标准曲线的关系计算样本中HEXA的含量,反映溶酶体酶活性和泰-萨克斯病相关状态。
产品名称
人氨基己糖苷酶A(HEXA)elisa试剂盒
灵敏度
0.078125ng/mL
英文名称
human HEXA elisa kit
货号
PH24279
检测范围
0.15625ng/mL-10ng/mL
品牌
派瑞曼
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
夹心法标曲:
核心参数:
检测原理:经典双夹心 ELISA 免疫测定
种属反应性:人源溶酶体水解酶特异性识别
检测时间:2.5~3h
保存条件:2~8℃避光存放
特异性:仅识别 HEXA,不与 HEXB 等同工酶交叉
板内变异系数:<8%样本处理指南:
血清样本
全血标本室温放置2小时或4℃过夜
1000×g离心20分钟,取上清液检测
暂不检测的样本按单次用量分装,-20℃/-80℃冻存,避免反复冻融
血浆样本
采用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本
采集后30分钟内于2-8℃环境下1000×g离心15分钟
取上清液检测,避免使用溶血、高血脂样本
组织匀浆样本
预冷PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液
按1:9重量体积比加入PBS(1g组织对应9mL PBS),可添加蛋白酶抑制剂
冰上充分研磨或超声破碎,5000×g离心5-10分钟
取上清液检测
细胞培养上清样本
1000×g离心20分钟,去除细胞碎片
取上清液检测,避免使用含NaN3的样本(会抑制HRP酶活性)
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