该试剂盒采用双抗体夹心法,将纯化的人硫酸软骨素蛋白多糖5(CSPG5)抗体包被于微孔板上,形成固相抗体。向微孔中依次加入待检样本和酶标记的CSPG5抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在酶的催化下转化为蓝色,再经酸终止反应后变为黄色。颜色的深浅与样本中CSPG5的含量呈正相关,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),可计算样本中CSPG5的浓度。
产品名称 | 人硫酸软骨素蛋白多糖5(CSPG5)elisa试剂盒 | 灵敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名称 | human CSPG5 elisa kit | 货号 | PH25966 |
检测范围 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夹心法标曲:
核心参数:
检测原理:双抗体夹心法 ELISA
种属反应性:仅人
检测时间:90-110min
保存条件:2-8℃避光密封冷藏,禁止冷冻
特异性:特异性识别人 CSPG5,无同源蛋白交叉反应
板内变异系数:≤8%
关键注意事项:
实验操作需严格按照说明书标注的时间、加液量及顺序进行,温育温度和时间误差会影响结果准确性
不同批次的试剂盒组分不能混用(洗涤液和终止液除外);试剂瓶盖需旋紧,防止蒸发和微生物污染
底物显色液应呈无色或浅色调,若已变蓝则不可使用;实验过程中需避免强光直接照射试剂和酶标板
所有试剂使用前需充分混匀,建议使用微量振荡器(低频率),避免剧烈震荡产生气泡
标准品和样本建议做双孔检测,取平均值计算结果,提高数据可靠性
实验中使用的试管、枪头等耗材需一次性使用,避免交叉污染;检测血液等标本时,需严格遵守生物实验室安全防护条例
若样本OD值高于标准曲线上限,需用样本稀释液适当稀释后重新检测,最终结果需乘以稀释倍数
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