Recombinant Human IKBα规格
商品介绍:

A-01K99527-50μg | Recombinant Human IKBα规格 |
A-01K99527-200ug | Recombinant Human IKBα规格 |
A-01K99527-1mg | Recombinant Human IKBα规格 |
别称:alpha; I-kappa-B-alpha; IkappaBalphaNF-kappa-B inhibitor alpha; IKBAikB-alpha; IkBalpha; IkB-alpha; MAD3; MAD-3; Major histocompatibility complex enhancer-binding protein MAD3; NFKBI; NFKBIA; nuclear factor of kappa light chain gene enhancer in B-cells; nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor
标签:Western Blot,ELISA
种属:Human
宿主:E.Coli
表达区间:7-266aa
分子量:57.4 KDa
应用:Western Blot, ELISA
性状:Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
纯度:Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
溶解方法:Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储:-20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution
商品概述:

Recombinant Human IκBα,即重组人核因子κB抑制蛋白α(也称为NFKBIA或MAD-3),是一种通过基因工程技术(通常在大肠杆菌中表达)制备的人源IκBα蛋白。作为NF-κB信号通路中的关键负调控因子,它通过其锚蛋白重复序列(Ankyrin Repeats)与NF-κB二聚体(如p65/p50)紧密结合,掩盖其核定位信号(NLS),从而将NF-κB滞留在细胞质中使其处于非活性状态;在炎症或应激信号刺激下,IκBα会在Ser32/Ser36位点发生磷酸化并随后被泛素化降解,
重组蛋白的制备流程:

重组蛋白的制备流程主要包括以下几个关键步骤:
1.基因获取:从生物体中提取目的基因,可通过PCR技术扩增特定DNA片段,也可以人工合成基因序列,确保所获取的基因能编码目标重组蛋白。
2.载体构建:将获取的目的基因与合适的载体连接,常见载体有质粒、噬菌体等。载体需具备复制原点、筛选标记等元件,使目的基因能在宿主细胞中稳定复制和表达。
3.宿主细胞转化:把构建好的重组载体导入宿主细胞,如大肠杆菌、酵母细胞或哺乳动物细胞等。转化方法有化学转化法、电穿孔法等。
4.筛选与鉴定:运用抗生素筛选、PCR鉴定、测序等方法,挑选出含有重组载体的阳性克隆细胞。
5.蛋白表达:优化培养条件,诱导阳性克隆细胞表达重组蛋白。根据宿主细胞类型和蛋白特性,调整温度、诱导剂浓度等参数。
6.蛋白纯化:采用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤等方法,从细胞裂解液或培养液中分离纯化重组蛋白。
7.质量检测:对纯化后的重组蛋白进行纯度、活性、分子量等检测,确保其符合质量要求。
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收到产品后的处理:

离心收集:重组蛋白通常以冻干粉形式提供。在运输过程中,粉末可能会粘附在管壁或管盖上。因此,在开盖前,务必先进行短暂离心(例如 10,000-12,000 rpm,30秒),将冻干粉收集于管底。
复溶操作
选择合适的溶剂:
仔细阅读产品说明书,严格按照推荐的溶剂和浓度进行复溶。
通常使用无菌的 PBS 缓冲液或低盐缓冲液(如 10 mM Tris, pH 8.0)。
切勿使用纯水,因为缺乏缓冲能力和合适的离子强度可能导致蛋白沉淀或失活。
轻柔混匀:
向冻干粉中加入推荐体积的溶剂,用移液器枪头轻轻吹打或缓慢上下颠倒混匀。
绝对禁止涡旋震荡,因为剧烈的剪切力会破坏蛋白质的空间结构,导致其变性失活。
如果蛋白难以溶解,可将其置于 4℃ 静置 2 小时以上或在水平摇床上低速摇晃。
达到推荐浓度:
初次复溶时,建议将蛋白浓度配制在说明书推荐的范围内(通常不低于 100 μg/mL),这有助于维持蛋白的稳定性。
关键字: IKBα;Human;E.Coli;
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