大鼠鸟苷酸交换因子(GEF)elisa试剂盒
商品属性：
英文名称 | RatGEF elisa kit | 灵敏度 | 0.15625ng/ml |
检测范围 | 0.3125ng/ml-20ng/ml | 货号 | PR9471 |
核心参数：
检测原理：双抗体夹心法酶联免疫吸附试验
种属反应性：仅适配大鼠 GEF 检测
样本类型：血清、组织匀浆、细胞上清液
检测时间：2.5–3 小时
保存条件：2–8℃密封冷藏
特异性：特异性强，与无关因子无交叉反应
板内 / 板间变异系数：板内＜8%，板间＜10%
夹心法数据：
| 校准品浓度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.713 | 1.568 | 0.837 | 0.495 | 0.292 | 0.156 | 0.092 | 0.042 |
| 校正OD值 | 2.672 | 1.526 | 0.796 | 0.453 | 0.250 | 0.115 | 0.050 | 0.000
|
夹心法标曲：
产品定义：
GEF是一类能够激活小G蛋白的信号分子，通过催化小G蛋白结合GDP转化为GTP的过程，调控细胞增殖、分化、迁移和囊泡运输等多种生理过程，其突变或异常激活与肿瘤发生、神经发育障碍相关。
操作步骤:
试剂盒平衡：实验前20分钟将试剂盒从冰箱取出，平衡至室温（20-25℃）
板条准备：从铝箔袋中取出所需板条，剩余板条密封放回2-8℃保存
加样
标准品孔：加入不同浓度标准品50μL（浓度通常为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL）
样本孔：先加样本稀释液40μL，再加待测样本10μL（最终稀释5倍）
空白孔：不加任何液体
加酶标抗体：除空白孔外，每孔加入HRP标记的检测抗体100μL
温育：封板膜封板后，37℃温育60分钟
洗涤
弃去孔内液体，吸水纸上拍干
每孔加满洗涤液（350μL），静置1分钟后弃去，重复洗板5次
最后一次洗涤后彻底拍干孔内液体
显色：每孔加入显色剂A、B各50μL，轻轻混匀，37℃避光显色15分钟
终止反应：每孔加入终止液50μL，蓝色立即转为黄色
读数：15分钟内用酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值
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