大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)elisa试剂盒
商品属性:

英文名称 | RatKRAS elisa kit | 灵敏度 | 0.15625ng/mL |
检测范围 | 0.3125ng/mL-20ng/mL | 货号 | PR8911 |
核心参数:

检测原理:双抗体夹心法 ELISA
种属反应性:仅大鼠 KRAS 特异反应
样本类型:血清、肿瘤组织匀浆、细胞上清
检测时间:2.5–3h
保存条件:2–8℃冷藏,避免反复冻融
特异性:专一识别 KRAS,RAS 家族其他亚型交叉反应低
板内 / 板间变异系数:板内 CV<8%,板间 CV<10%
夹心法数据:

| 校准品浓度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.713 | 1.568 | 0.837 | 0.495 | 0.292 | 0.156 | 0.092 | 0.042 |
| 校正OD值 | 2.672 | 1.526 | 0.796 | 0.453 | 0.250 | 0.115 | 0.050 | 0.000
|
夹心法标曲:


产品定义:

KRAS是一种小G蛋白,参与细胞增殖、分化和存活的信号传导调控,其突变在胰腺癌、肺癌和结直肠癌中高频发生,突变型KRAS蛋白持续激活下游信号通路,驱动肿瘤发生发展,是肿瘤靶向治疗的重要靶点。
操作步骤:

试剂盒平衡:实验前20分钟将试剂盒从冰箱取出,平衡至室温(20-25℃)
板条准备:从铝箔袋中取出所需板条,剩余板条密封放回2-8℃保存
加样
标准品孔:加入不同浓度标准品50μL(浓度通常为10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μg/mL)
样本孔:先加样本稀释液40μL,再加待测样本10μL(最终稀释5倍)
空白孔:不加任何液体
加酶标抗体:除空白孔外,每孔加入HRP标记的检测抗体100μL
温育:封板膜封板后,37℃温育60分钟
洗涤
弃去孔内液体,吸水纸上拍干
每孔加满洗涤液(350μL),静置1分钟后弃去,重复洗板5次
最后一次洗涤后彻底拍干孔内液体
显色:每孔加入显色剂A、B各50μL,轻轻混匀,37℃避光显色15分钟
终止反应:每孔加入终止液50μL,蓝色立即转为黄色
读数:15分钟内用酶标仪在450nm波长处测定各孔OD值
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