人Flag标签(Flag-tag)elisa试剂盒
商品属性：
英文名称 | human Flag-tag elisa kit | 灵敏度 | 0.15625ng/ml |
检测范围 | 0.3125ng/ml-20ng/ml | 货号 | PH25038 |
核心参数：
检测原理：双抗体夹心法，特异性识别重组蛋白 Flag 标签肽段，免疫结合显色定量标签表达量。
种属反应性：适配人细胞表达的 Flag 标签重组蛋白检测。
样本类型：细胞裂解液、细胞上清、纯化重组蛋白样本。
检测时间：3.5–4.5h。
保存条件：2–8℃避光冷藏。
特异性：特异性识别 Flag 标签，与人内源蛋白无交叉反应。
板内 / 板间变异系数：板内 CV＜8%，板间 CV＜10%。
夹心法数据：
| 校准品浓度(ng/mL) | 20.00 | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.713 | 1.568 | 0.837 | 0.495 | 0.292 | 0.156 | 0.092 | 0.042 |
| 校正OD值 | 2.672 | 1.526 | 0.796 | 0.453 | 0.250 | 0.115 | 0.050 | 0.000
|
夹心法标曲：
产品定义：
Flag标签是一种由8个氨基酸（DYKDDDDK）组成的多肽标签，常用于重组蛋白的表达、纯化和检测，通过与抗Flag标签抗体结合，可方便地对目标蛋白进行定性、定量分析和定位研究。
试剂准备:
平衡：所有试剂回温至室温（20–25℃）。
洗涤液（1×）：30 mL 25× 浓缩洗液 + 720 mL 去离子水，混匀，2–8℃可存 1 个月。
标准品稀释：
每瓶标准品加1 mL稀释液，静置 15 min，轻柔混匀（避免气泡），得最高浓度 S7。
准备 7 个 EP 管，各加250 μL稀释液，倍比稀释：
S7：原液（如 160 μg/L）
S6：250 μL S7 + 250 μL 稀释液
S5 至 S1 依次稀释
S0：稀释液（空白对照）
生物素化抗体（1×）：按 1:100 稀释（如 12 μL 100× 浓缩 + 1.2 mL 稀释液），现配现用。
SAV‑HRP（1×）：按 1:100 稀释，现配现用，避光。
常见问题
高背景：洗板不足、SAV‑HRP 浓度过高、孵育温度过高 / 时间过长、污染。
标准曲线线性差：标准品稀释错误、孵育时间不准、读数超时。
样品值偏低：样品降解、稀释倍数过高、加样误差。
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