人真皮成纤维细胞是真皮组织的主要细胞成分,参与皮肤结构维持、损伤修复和胶原蛋白合成。可分泌胶原蛋白、弹性纤维等细胞外基质,维持皮肤的韧性和弹性,在皮肤损伤时大量增殖,促进伤口愈合,过度增殖会导致瘢痕形成。常用于研究皮肤生理功能、创伤修复机制、瘢痕防治及皮肤医学药物研发。
产品名称 人真皮成纤维细胞
英文名称:Human Dermal Fibroblast Cells
货号:YS-01X7340
组织来源 皮肤组织
种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介:实验室分离的人真皮成纤维细胞采用先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的人真皮成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液:0.25%胰蛋白酶人真皮成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

人真皮成纤维细胞分离自皮肤组织内的真皮层;皮肤
组织来源包括头部、脸部、手、脚、腿、背部、腹部、包皮等体表部位皮肤,可依据需求选用;真皮,位于表皮深层,向下与皮下组织相连,真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起,埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维,使皮肤既有弹性,又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的真皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。真皮成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持组织的正常形态,合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。

细胞组成:皮肤真皮层结缔组织成纤维细胞
形态结构:梭形、扁平多角形,网状贴壁生长
分子标记:Vimentin、Collagen Ⅰ/Ⅲ、Fibronectin
功能特性:皮肤胶原合成、创面修复、真皮基质更新、抗衰老代谢

合成胶原蛋白、弹性蛋白,维持皮肤真皮层结构与弹性
参与皮肤创伤愈合、肉芽组织生成与瘢痕修复
分泌细胞因子,调节皮肤局部炎症与微环境稳态
延缓皮肤老化,调控真皮组织代谢与更新

1.无菌取出组织,预冷 PBS 反复冲洗,去除血迹、气管及杂质组织。
2.将组织剪碎至 1mm³ 细小组织块,PBS 反复漂洗,去除漂浮杂质与死细胞。
3.加入混合消化液(胰酶 + 胶原酶),37℃水浴消化 20~30min,间断轻柔吹打;血清培养基加入终止消化。
4.细胞悬液过 100μm 滤网,收集滤液,300g 离心 5min,弃上清,PBS 重悬洗涤一次。
5.完全培养基重悬细胞,调整合适密度接种于培养皿;置于 37℃、5% CO₂培养箱静置培养。
6.培养 24h 后首次换液,利用差速贴壁特性:成纤维细胞贴壁快,去除未贴壁上皮等杂细胞;之后每 2~3 天换液一次。

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关键字: 人真皮成纤维细胞;皮肤组织;成纤维细胞样;
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