1、高亮度:具有较高的荧光量子产率,可提供明亮、清晰的信号。
2、稳定性好:对生理pH范围内的变化不敏感,具有良好的光稳定性,适合长时间成像。
3、光谱可分:其发射波长与经典的FAM染料(约520 nm)存在显著差异,使得这两种染 料可以在多重检测中同时使用而信号不重叠。
1、分子诊断与测序:作为四色荧光标记系统(与FAM, TAMRA, ROX等联用)的核心染料 之一,用于自动化DNA测序。是多种实时定量PCR (qPCR) 平台 TaqMan探针中常用的报告基团。
2、核酸分析:可用于标记引物或探针,提供黄色荧光信号,用于DNA/RNA的片段分析、 荧光原位杂交 (FISH) 等。
3、生物标记与成像:通过其末端的羧基(–COOH),或转化为NHS酯等活性形式,与蛋 白质、抗体、多肽等生物分子偶联。用于活细胞成像、免疫荧光标 记、流式细胞术等研究。
4、多通道荧光实验:其明亮的黄色荧光可与蓝色、绿色或红色荧光染料组合,实现多重 标记和信号检测。
6-JOE本身是一种“非活化”的羧酸形式。其苯环上的羧基是关键的化学“把手”,可以通过EDC/NHS等试剂进行活化。活化后的NHS酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯)可高效、稳定地与蛋白质、抗体或修饰后的核酸上的伯氨基(-NH₂) 发生反应,形成稳定的酰胺键(CONH-),从而实现共价标记。
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荣莉