兔真皮微血管内皮细胞

商品属性

细胞简介

兔真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织；真皮，位于表皮深层，向下与皮下组织相连，真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起，埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维，使皮肤既有弹性，又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞（MEC）在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域，由于表皮细胞、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟，人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。与之相比，对参与创面愈合过程的另一种主要细胞——真皮微血管内皮细胞，则因其体外分离培养技术的困难而使相关的研究受限。
产品信息

产品名称 兔真皮微血管内皮细胞

组织来源 皮肤组织

种属 兔
产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的兔真皮微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的兔真皮微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%胰蛋白酶兔真皮微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
生物特征

细胞组成：皮肤真皮微血管单层内皮细胞

形态结构：短梭形、多边形，铺路石样排列，边界清晰

分子标记：CD31、vWF、VE-cadherin 阳性

功能特性：微血管物质交换、血管生成，皮肤微循环调控与创面血管化

核心功能

构成皮肤微血管屏障，调节物质交换与组织灌注

调控血管收缩舒张，维持真皮局部血液循环

介导炎症细胞黏附迁移，参与皮肤炎症应答

参与皮肤创面血管新生，促进伤口修复
实验室培养与操作指南

原代细胞分离方法

采用胶原酶-胰酶联合消化法：

将组织剪碎至1mm³大小

加入含0.1%Ⅰ型胶原酶和0.25%胰蛋白酶的消化液，37℃振荡消化60-90分钟

200目滤网过滤，去除未消化组织

1200rpm离心5分钟，弃上清液收集细胞沉淀

用PBS重悬细胞，接种至培养瓶

培养条件

培养基：专用细胞培养基（含10%胎牛血清、1%双抗、成脂诱导因子）

培养环境：37℃、5%CO₂饱和湿度培养箱

包被处理：培养瓶需经多聚赖氨酸（0.1mg/ml）包被，增强细胞贴壁性

换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基

传代操作步骤

吸弃旧培养基，用PBS轻洗细胞层2次

加入0.25%胰蛋白酶，37℃消化1-3分钟，显微镜下观察细胞回缩变圆

加入等体积培养基终止消化，轻轻吹打细胞使其脱落

1000rpm离心5分钟，弃上清后用培养基重悬细胞

按1:2或1:3比例接种至新培养瓶

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