小鼠胚胎干细胞 新品

小鼠胚胎干细胞是从小鼠早期胚胎内细胞团分离获得的多能干细胞，具有无限自我更新能力与向三胚层所有细胞分化的潜能，是发育生物学研究、疾病模型构建及再生医学的核心工具。
产品名称 小鼠胚胎干细胞

英文名称：Mouse Embryonic Stem Cells

货号：YS-01X7728

组织来源 囊胚

种属 小鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介：实验室分离的小鼠胚胎干细胞采用分离囊胚组织，去除胚胎透明带、使用特制专用培养基筛选培养，胰酶消化传代纯化制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的小鼠胚胎干细胞经Oct-4免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：包被条件明胶(0.1%)

培养基含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：短梭形、多角形

传代特性：可传3-5代左右

消化液：0.025%胰蛋白酶小鼠胚胎干细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

小鼠胚胎干细胞分离自囊胚胚胎组织；胚胎干细胞(Embryonic stem cell，ESCs，简称ES、EK或ESC细胞)是早期胚胎(原肠胚期之前)或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。进一步说，胚胎干细胞(ES细胞)是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞。ES细胞具有与早期胚胎细胞相似的形态结构，细胞核大，有一个或几个核仁，胞核中多为常染色质，胞质胞浆少，结构简单。体外培养时，细胞排列紧密，呈集落状生长。用碱性磷酸酶染色，ES细胞呈棕红色，而周围的成纤维细胞呈淡黄色。细胞克隆和周围存在明显界限，形成的克隆细胞彼此界限不清，细胞表面有折光较强的脂状小滴。细胞克隆形态多样，多数呈岛状或巢状。小鼠ES细胞的直径7 微米～18 微米，猪、牛、羊ES细胞的颜色较深，直径12 微米～18 微米。胚胎干细胞与普通细胞有显著差别，有其特定的生长特性：和特定的标志，例如碱性磷酸酶活性非常高，带有胚胎阶段特异性表面抗原( Stage- specific embryonic antigens,SSEA)，人类胚胎干细胞还带有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等标志，这些特性和标志均可以用于对胚胎干细胞进行鉴定，除此之外，胚胎干细胞还可以在体外永久传代，并保持正常核型。在体外培养体系中加入分化抑制剂如白血病抑制因子( Leukaemia inhibitory factor,LF)或者在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层(MEF)上培养时，胚胎干细胞都能呈克隆性增殖，长期保持核型正常和稳定，冻存解冻也不影响不分化的特性。另外，胚胎干细胞还表现岀高水平端粒酶活性，目前证明端粒酶与细胞衰老密切相关，多数成熟细胞的端粒酶活性都很低。这些都是胚胎干细胞与成熟细胞不同的重要特点，也可能是其复制生命期限远比体细胞长的原因。

细胞组成：小鼠囊胚内细胞团来源全能干细胞，未分化原始细胞群

形态结构：圆形、胞体小，核大胞质少，紧密抱团形成球状克隆，边界清晰

分子标记：OCT4、Sox2、Nanog、SSEA-1、AP（碱性磷酸酶阳性）

功能特性：全能性，可无限自我更新，分化为三胚层所有组织细胞，是发育生物学、基因编辑、分化研究核心工具细胞

全能干细胞，无限自我更新、多向分化

可分化为机体各类组织功能细胞

用于发育生物学、基因编辑研究

助力再生医学、疾病模型构建

1.取材：新鲜组织（动物 / 临床），预冷 PBS 冲洗，去除血污、脂肪、包膜。

2.修剪：剪成1 mm³小块，PBS 洗 3–5 次至澄清。

3.消化：

加 3–5 倍体积0.25% 胰酶，37℃孵育10–20 min，每 5 min 轻摇。

纤维组织换胶原酶，37℃消化 30–60 min。

4.终止：加等体积含血清培养基中和胰酶。

5.过滤：100 μm 筛过滤，弃未消化块。

6.离心：300–400 g × 5 min，弃上清；PBS 重悬洗涤 1 次。

7.接种：完全培养基重悬，计数；按1×10⁵–5×10⁵ cells/cm²接种。

8.培养：37℃、5% CO₂；24 h 内不动，48–72 h 首次换液。