荧光探针PCR即基于荧光探针的实时荧光定量PCR（qPCR），是一种通过特异性荧光探针在PCR扩增过程中实时监测目标核酸序列的技术，具有高特异性和高灵敏度。
常用的荧光探针法包括：
TaqMan探针法：最广泛应用，适用于基因表达分析、病原体检测等。
分子信标法：形成发夹结构，特异性更强，适合SNP检测。
TaqMan-MGB探针：结合小沟结合物，提升熔解温度和特异性，适用于复杂样本分析。
实验步骤：
一、样品RNA提取
样本类型：血液、粪便、病灶渗出物或培养物。
提取方法：
使用商业化病毒RNA提取试剂盒（如柱式法）或本试剂盒配套的DNA抽提液进行粗提。
对血液样本，先分离外周血淋巴细胞，再提取RNA。
设置样品制备阳性对照（PC） 和 阴性对照（NC），分别使用已知阳性核酸片段和水作为对照。
二、标准曲线稀释（用于定量分析）
使用试剂盒提供的高浓度阳性对照（如1×10⁸ 拷贝/μL），在独立区域用荧光RT-PCR专用模板稀释液进行10倍梯度稀释，制备10²–10⁷ 拷贝/μL的6个标准品。
稀释过程需更换枪头，防止交叉污染，所有操作置于冰上待用。
三、PCR反应体系配制（20 μL体系）
成分 加入量
探针法qRT-PCR缓冲液 10 μL
探针法qRT-PCR酶混合液 1 μL
引物-探针混合液（针对HTLV-1保守区如LTR或env） 3 μL
待测RNA模板或标准品 6 μL
超纯水 补足至20 μL
四、qPCR扩增程序
步骤 温度 时间 循环数
逆转录 50℃ 10 min 1
预变性 95℃ 10 min 1
PCR扩增 95℃ 15 sec 40
60℃ 60 sec（采集FAM荧光信号）
五、结果判定
有效性判断：
阴性对照无扩增曲线；
阳性对照Ct值 ≤ 35，否则实验无效。
结果解读：
Ct值 ≤ 35：阳性，提示HTLV-1核酸存在；
Ct值 > 40：阴性；
35 < Ct值 ≤ 40：可疑，建议复检。
公司正在出售的产品：
| 人轮状病毒抗原(RV Ag) | 马泰勒梨形虫PCR检测试剂盒原 |
| 人轮状病毒(RV)IgM | 莱氏泰勒虫PCR检测试剂盒 |
| 人卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG) | 吕氏泰勒虫PCR检测试剂盒 |
| 人卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE) | 突变泰勒虫PCR检测试剂盒 |
| 人卵清白蛋白 | 东方泰勒虫PCR检测试剂盒 |
| 人卵泡抑素(FS) | 小泰勒虫PCR检测试剂盒 |
| 人卵磷脂酶 | 瑟氏泰勒虫PCR检测试剂盒 |
| 人卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT) | 泰勒属原虫通用PCR检测试剂盒 |
| 人卵巢癌抗原X1(OVX1) | 尤氏泰勒虫PCR检测试剂盒 |
| 人卵巢癌标志物CA125 | 即蜱传脑炎病毒PCR检测试剂盒 |
| 人硫脂抗体 | 蜱传出血热病毒PCR检测试剂盒 |
| 人硫氧化还原蛋白(Trx) | 托克特诺病毒PCR检测试剂盒 |
| 人硫氧还蛋白域包含蛋白6(TXNDC6) | 荧光探针PCR刚地弓形虫PCR检测试剂盒 |
| 人硫氧还蛋白还原酶(TrxR) | 斑点病密螺旋体PCR检测试剂盒 |
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