基本信息
中文名称:5-荧光素-马来酰亚胺 / 荧光素-马来酰亚胺丙酰胺 / 5-异硫氰酸荧光素-马来酰亚胺
英文名称:5-FITC-Maleimide / Fluorescein Maleimide / Maleimide-5-FITC / FITC-Mal
CAS 号:2228857-33-6
分子式:C₂₇H₁₉N₃O₇S
分子量:529.52
外观:橙黄色至黄色固体粉末或结晶
纯度:≥95%(HPLC),可提供 mg 级及 g 级产品
溶解性:易溶于 DMSO、DMF、甲醇等极性有机溶剂;在水中溶解性有限,可先溶于有机溶剂后再分散于水性缓冲液中
使用注意事项
储存条件:-20°C 以下干燥、避光、密封保存,惰性气体保护为佳。马来酰亚胺基团对水汽敏感,易水解失效,需严格防潮,避免反复冻融,建议现配现用。
反应条件:推荐在 pH 6.5–7.5 的缓冲液(如 PBS、HEPES 缓冲液)中进行标记反应,反应温度通常为室温(20–25°C),反应时间 30 分钟至 2 小时。pH 低于 6 时反应活性降低,pH 高于 8.5 时马来酰亚胺可能发生水解。
染料与蛋白比例:通常使用 5–20 倍摩尔过量的染料,具体比例需根据目标蛋白的巯基数量优化。
还原二硫键:若目标分子中巯基以二硫键形式存在,需先用 TCEP 或 DTT(注意 DTT 含巯基,需先去除)将二硫键还原为游离巯基后再进行标记。
去除未反应染料:标记完成后通过凝胶过滤柱(如 Sephadex G-25)、透析或超滤管(MWCO 适当截留)去除游离染料。
避光操作:全程避光,防止荧光染料光漂白。
溶解建议:优先用无水 DMSO 或无水 DMF 溶解,避免水分导致马来酰亚胺水解。
温馨提示:供应产品仅用于科研,不能用于人体!
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