人核糖体蛋白S6激酶α5(RPS6Ka5)重组蛋白适配 S6 磷酸化激酶活性分析、翻译起始调控、细胞应激应答及肿瘤增殖相关信号通路体外研究。
型号:YS-DB2542
产品名称:人核糖体蛋白S6激酶α5(RPS6Ka5)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Ribosomal Protein S6 Kinase Alpha 5 (RPS6Ka5)
MSK1; MSPK1; RLPK; RSKL; RSK-like protein kinase; 90 kDa ribosomal protein S6 kinase 5; Nuclear mitogen- and stress-activated protein kinase 1
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::细胞核, 细胞质
预测分子量:42.5kDa
实际分子量:44kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Glu2~Phe348 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:5.9
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

体外激酶活性测定:S6 底物肽磷酸化反应,磷酸化特异性 WB 定量激酶催化活力。
底物特异性验证:对比多种丝 / 苏氨酸肽段磷酸化效率,确认 S6 底物偏好性。
SDS-PAGE 纯度质控:分析蛋白均一性、杂蛋白污染。
WB 蛋白身份验证:抗体杂交确认重组构建无误。
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常见实验场景操作指南:

细胞培养实验
浓度优化:先设置预实验梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况,确定最优工作浓度。
添加时机:细胞接种后24-48小时,待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。
更换培养基:若蛋白半衰期较短,需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。
免疫检测实验
阳性对照设置:在ELISA或WB实验中,用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线,确保定量准确性。
封闭处理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭,降低非特异性结合。
抗体配对:选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体,避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。
蛋白相互作用实验
标签选择:若使用Pull-down实验,优先选择GST或His标签的重组蛋白,便于亲和层析分离。
反应条件:在生理缓冲液(如PBS)中进行,温度控制在4℃,避免蛋白变性。
阴性对照:设置不含目标蛋白的对照组,排除标签非特异性结合的干扰。
关键字: 人核糖体蛋白S6激酶α5;RPS6Ka5;重组蛋白;
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