人饥饿素-O-乙酰基转移酶(GOAT)重组蛋白适用于饥饿素乙酰化修饰活性检测、食欲调控代谢通路、能量平衡及肥胖相关分子体外机制研究。
型号:YS-DB20
产品名称:人饥饿素-O-乙酰基转移酶(GOAT)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Ghrelin-O-Acyltransferase (GOAT)
OACT4; MBOAT4; Membrane Bound O-Acyltransferase Domain Containing Protein 4
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::n/a
预测分子量:-
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:-
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

酰基转移酶酶活检测:以饥饿素多肽为底物,GOAT 介导辛酰基转移,质谱 / 特异性抗体检测乙酰化饥饿素产物定量酶活。
脂酰 CoA 供体依赖性验证:验证辛酰 CoA 为最优酰基供体,匹配 GOAT 生化特征。
SDS-PAGE 纯度分析:评估蛋白纯度、膜蛋白折叠完整性。
底物专一性验证:其他多肽无明显酰化修饰,证明饥饿素底物特异性。
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复溶操作要点:

复溶前准备
工具消毒:移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理,避免引入污染。
缓冲液选择:优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液,若无推荐可使用:
基础型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保护型:在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢剂(如0.05% Triton X-100),酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心:将冻干蛋白管置于离心机,4℃下8000rpm离心30秒,使底部蛋白集中。
缓慢加液:沿管壁缓慢加入适量缓冲液,避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解:轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸,禁止涡旋振荡(易导致蛋白变性)。
静置溶解:4℃静置10-30分钟,难溶蛋白可延长至1小时,期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字: 人饥饿素-O-乙酰基转移酶;GOAT;重组蛋白;
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