商品属性:
产品名称 | 人鞘氨醇激酶1(SPHK1)重组蛋白 | 型号 | YS-DB778 |
物种 | Homo sapiens (Human,人) | 用途 | 仅供科研实验 |
型号:YS-DB778
产品名称:人鞘氨醇激酶1(SPHK1)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Sphingosine Kinase 1 (SPHK1)
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::细胞核, 细胞质
预测分子量:29.2kDa
实际分子量:32kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Leu148~Leu398 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:6.9
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
核心参数:
用于鞘氨醇磷酸化酶活检测、鞘脂信号通路调控研究、细胞增殖凋亡平衡及炎症、肿瘤相关靶向抑制剂体外筛选实验。
基础核心参数
基因:SPHK1;定位:17q25.3;脂激酶~49 kDa;胞质可转位至细胞膜
核心生物功能
① 磷酸化鞘氨醇生成鞘氨醇 - 1 - 磷酸 S1P,脂质信号分子合成限速酶。
② S1P 调控细胞增殖、迁移、抗凋亡、血管生成,驱动炎症、纤维化、多种肿瘤进展。
复溶操作要点:
复溶前准备
工具消毒:移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理,避免引入污染。
缓冲液选择:优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液,若无推荐可使用:
基础型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保护型:在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢剂(如0.05% Triton X-100),酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心:将冻干蛋白管置于离心机,4℃下8000rpm离心30秒,使底部蛋白集中。
缓慢加液:沿管壁缓慢加入适量缓冲液,避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解:轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸,禁止涡旋振荡(易导致蛋白变性)。
静置溶解:4℃静置10-30分钟,难溶蛋白可延长至1小时,期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
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关键字: 人鞘氨醇激酶1;SPHK1;重组蛋白;
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